Нейрогенетика и генетика наследственных заболеваний
Генетика тромбофилии: выявление полиморфизмов генов F2, F5, F7, F13, FGB, ITGA2, ITGB3, PAI-1 (код 01.02.05.270)
Тромбофилия – состояние системы крови, проявляющееся в нарушении гемостаза и склонности к развитию рецидивирующих сосудистых тромбозов (преимущественно венозных) различной локализации и часто возникающее в связи с беременностью, после хирургического вмешательства, травмы или физического перенапряжения. Заболевание обусловлено генетической (у 30–50 % с тромботическим состоянием) или приобретенной патологией клеток крови, а также дефектами свертывающей системы крови. Структурно в системе гемостаза выделяют: плазменное звено (факторы свертывания и образование фибрина – гены F2, F5, F7, F13, FGB) и сосудисто-тромбоцитарное звено (адгезия тромбоцитов к сосудистой стенке, сокращение сосудов, агрегация тромбоцитов, формирование тромба – гены ITGA2, ITGB3, PAI-1).
Наследственная тромбофилия представляет собой предрасположенность к тромбозу вследствие генетических дефектов как свертывающей, так и антикоагулянтной и фибринолитической системы крови. Генетический анализ позволяет выявить полиморфизмы генов факторов и компонентов системы гемостаза, которые приводят к их аномальному синтезу или нарушению функциональной активности. Это позволяет оценить риски развития сердечно-сосудистой патологии и акушерско-гинекологических осложнений, тромбоэмболии, венозных и артериальных тромбозов. Скрининг генетических особенностей тромбофилий помогает на раннем этапе выявить группу риска и внести соответствующие коррективы в тактику ведения пациентов.
Подготовка к исследованию:
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется забор крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.
Показания к генетическому анализу:
Случаи наследственной тромбоэмболии в семье
Случаи тромбоза в анамнезе:
единичный тромбоз до 50 лет
повторные тромбозы;
случай тромбоза в любом возрасте при наличии семейного анамнеза;
тромбозы необычной локализации (портальные, брыжеечные, мозговые вены);
тромбоз непонятной этиологии после 50 лет;
Применение гормональной контрацепции или гормональной заместительной терапии у женщин, имеющих тромбозы в анамнезе, имеющих родственников I степени родства с диагностированной наследственной тромбофилией или семейный анамнез тромбоэмболических осложнений;
Осложненный акушерский анамнез;
Женщины, планирующие беременность, имеющие тромбозы в анамнезе, имеющие родственников I степени родства с диагностированной наследственной тромбофилией или семейный анамнез тромбоэмболических осложнений;
ситуации высокого риска:
массивные хирургические вмешательства;
длительная иммобилизация;
профилактика тромботических осложнений у больных онкологическими заболеваниями
Материал для исследования:венозная кровь в пробирке с ЭДТА
Метод определения: выявления и идентификации SNP методом ПЦР с анализом кривых плавления.
Сроки исполнения: 5 рабочих дней
Единицы измерения: описательный результат
Референсные значения:
Протромбогенный генотип не обнаружен.
Протективный генотип не обнаружен.
Интерпретация:
Исследование полиморфизма 20210 G>A в гене F2 кодирующий протромбин: Мутация гена протромбина заключается в замене гуанина на аденин в позиции нуклеотида 20210 (20210 G>А) в нетранслируемой области гена, что приводит к увеличению уровня протромбина на 30 %. Таким образом, генотип G/A и А/А может вносить вклад в состояние гиперкоагуляции.
Исследование 1691G>A полиморфизма в гене F5, кодирующем проакцелерин (мутация Лейдена): Замена гуанина на аденин в 1691 позиции гена фактора V (1691G>A) приводит к синтезу мутантного активированного фактора V. Фактор V выполняет функцию кофактора при превращении протромбина в тромбин фактором Х. Мутация Лейдена является основной причиной резистентности к протеину С, так как приводит к замещению в молекуле фактора V аминокислоты аргинина на глутамин в положении 506, в месте, где он расщепляется естественным антикоагулянтом – протеином С. Это замещение предотвращает инактивацию фактора V активированным белком C. Мутация Лейдена обладает огромным протромбогенным потенциалом. У носителей генотипа G/А и А/А риск тромбозов возрастает в 7 раз, а на фоне приема гормональных контрацептивов - еще в 6-9 раз.
Исследование полиморфизма -455 G>A в гене FGB, кодирующем фибриноген: Полиморфизм -455 G>A в гене фибриногена, замена гуанина на аденин в нуклеотидном положении -455 в промоторе гена, приводит к умеренно повышенному уровню фибриногена в плазме.
Исследование полимофризма 807 C>T в гене ITGA2, кодирующем интегрин (тромбоцитарный рецептор к коллагену): Ген ITGA2 кодирует белок интегрин α2β1, является частью основного тромбоцитарного рецептора GPIa/GPIIa, который связывается с субэндотелиальным коллагеном и играет важную роль в адгезии и активации тромбоцитов. Наличие генотипов С/Т и Т/Т влияет на экспрессию, функцию и иммуногенность компонентов адгезивных рецепторов тромбоцитов и приводит к умеренному увеличению скорости адгезии тромбоцитов и, таким образом, может быть генетическим фактором риска тромбоза.
Исследование полиморфизма 1565 T>C в гене ITGB3, кодирующем интегрин (тромбоцитарный рецептор к фибриногену): Ген ITGB3 кодирует белок интегрин бета-3 – мембранный гликопротеин, известный как тромбоцитарный гликопротеин IIIа (GP IIIа). На мембране тромбоцитов GPIIIa образует комплекс с GPIIb, представляющий собой тромбоцитарный рецептор фибриногена. Рецептор IIb/IIIa играет важную роль в развитии сердечно-сосудистых заболеваний. Тромбоциты носителей генотипов C/Т и Т/Т имеют значимо повышенную склонность к агрегации, что может являться причиной увеличения риска тромбообразования.
Исследование полиморфизма -675 5G>4G в гене PAI-1, кодирующем серпин: Эндотелиальный ингибитор – активатор плазминогена-1 (ИАП1) или серпин, член семейства ингибиторов сериновой протеазы, отрицательно регулирует фибринолиз и ухудшает растворение сгустков. Повышенный уровень ИАП1 связан с делецией/инсерцией гуанина (4G/5G и 4G/4G генотипом) в промоторе гена ИАП1, что приводит к умеренному снижению фибринолитической активности крови.
Исследование полиморфизма 10976 G>A в гене F7, кодирующем проконвертин: Полиморфизм 10976 G>A располагается в гене фактора VII и является результатом однократного замещения гуанина аденином, что приводит к замене аргинина на глутамин в кодируемом белке.. Циркулирующий фактор VII связывается с тканевым фактором и активируется до фактора VIIa. Высокий уровень фактора VII в крови связывают с повышенным риском смерти при инфаркте миокарда. Генотипы G/A и А/А приводят к значимому понижению экспрессии гена фактора VII и является защитным фактором в развитии тромбозов и инфаркта миокарда. При исследовании пациентов со стенозом коронарных артерий и инфарктом миокарда было обнаружено, что наличие аллели А приводит к понижению уровня фактора VII в крови на 30% и 2-х кратному понижению риска инфаркта миокарда даже при наличии заметного коронарного атеросклероза.
Исследование полиморфизма 103 G>T в гене F13 А1, кодирующем фибриназу: Ген F13 A1 кодирует A субъединицу фактора XIII, последний фермент, генерируемый в каскаде свертывания крови, который образует внутримолекулярные сшивки между молекулами фибрина и гамма-глутамил-эпсилон-лизина и, таким образом, стабилизирует кровяные сгустки. C/T и Т/Т генотипы приводят к замене аминокислоты, расположенной близко к сайту активации тромбина, значимо увеличивая скорость активации фактора XIIIA тромбином и приводя к аномальной структуре сгустка фибрина. Данный полиморфизм обладает протективным эффектом относительно развития инфаркта миокарда и тромбоза глубоких вен.
Литература:
1. А.Л. Комаров, О.О. Шахматова, Д.В. Ребриков, Д.Ю. Трофимов, Т.И. Коткина, Т.А. Илющенко, А.Д. Деев, Е.П. Панченко. Влияние генетических факторов, ассоциированных с тромбозами, на долгосрочный прогноз больных хронической ишемической болезнью сердца Рациональная Фармакотерапия в Кардиологии 2011;7(4)
2. Murin S, Marelich GP, Arroliga AC, Matthay RA. Hereditary thrombophilia and venous thromboembolism. Am J Respir Crit Care Med. 1998;158(5 I):1369-1373.
3. Stevens SM, Woller SC, Bauer KA, et al. Guidance for the evaluation and treatment of hereditary and acquired thrombophilia. J Thromb Thrombolysis. 2016;41(1):154-164. doi:10.1007/s11239-015-1316-1.
4. Michiels JJ, Hamulyák K. Laboratory diagnosis of hereditary thrombophilia. Semin Thromb Hemost. 1998;24(4):309-320. doi:10.1055/s-2007-996019.
5. Stevens SM, Woller SC, Bauer KA, et al. Guidance for the evaluation and treatment of hereditary and acquired thrombophilia. J Thromb Thrombolysis. 2016;41(1):154-164. doi:10.1007/s11239-015-1316-1.
6. Eldor A. Thrombophilia, thrombosis and pregnancy. In: Thrombosis and Haemostasis. Vol 86. ; 2001:104-111.