Системные ревматические заболевания
Иммуноблот антинуклеарных антител (код 01.02.15.165)
Метод для оценки специфичности антинуклеарных антител для дифференциальной диагностики системных ревматических заболеваний. Позволяет выявлять антитела аутоантигенам: Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа), SS-A (52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, dsDNA/Histone/Nucleosome, RibP, AMA-M2 и Jo-1.
Описание теста:
Антинуклерные антитела (АНА) представляют семейство аутоантител, связывающихся с рибонуклеиновыми кислотами, и ассоциированными с ними белками. Они встречаются более чем у 90% больных с диффузными болезнями соединительной ткани, а также часто отмечаются при аутоиммунных заболеваниях печени и ряде других состояний. На сегодняшний день охарактеризованы около 200 разновидностей этого семейства аутоантител, однако в связи с редкой встречаемость многих из них, не все разновидности антител используются для клинической диагностики.
Иммуноблот антинуклеарных антител позволяет в одном тесте одновременно провести исследование 15 основных разновидностей антинуклеарных антител, что обеспечивает проведение дифференциальной диагностики в пределах основных системных ревматических заболеваний. Каждая разновидность аутоантител, выявляемая с помощью иммуноблота, обычно отмечается у пациентов с характерной клинической картиной, поэтому спектр аутоантител позволяет не только диагностировать заболевание, а также установить риск развития определенных характеристик заболевания.
Иммуноблот антинуклеарных антител целесообразно использовать на втором этапе серологического обследования при положительном результате других тестов, указывающих на присутствие в сыворотке обследуемого антинуклеарных антител. К таким тестам относится выявление антинуклеарного фактора (АНФ), антинауклеарных антител и антител к экстрагируемому ядерному антигену (ЭНА) (см. описание тестов). Этот метод характеризует высокая специфичность обследования для диагностики ревматических системных заболеваний.
Специфичность антинуклеарных антител даже при высоких титрах АНФ (см. описание теста) удается установить не всегда, поскольку до сих пор остаются неохарактеризоваными ряд антигенов антинуклеарных антител. Отрицательный результат иммуноблота в этом случае не исключает диагноза системных ревматических заболеваний. Ряд антинуклеарных антигенов определяются с помощью иммуноблота аутоантител при полимиозите и иммуноблоте аутоантител при склеродермии (см. описание тестов).
Подготовка к исследованию:
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется забор крови не ранее, чем через 4 часа после последнего приема пищи.
Показания к назначению теста:
1. Системная красная волчанка;
2. Подострая кожная волчанки и другие разновидности кожной волчанки;
3. Смешанное заболевание соединительной ткани;
4. Синдром Шегрена и ассоциированные заболевания;
5. Диффузная и локализованная склеродермия, CREST синдром;
6. Воспалительные миопатии (полимиозит и дерматомиозит);
7. Ювенильный хронический артрит;
8. Аутоиммунный гепатит;
9. Первичный билиарный цирроз и склерозирующий холангит;
Использование данного теста показано при обнаружении высоких титров антинуклеарного фактора, антинуклеарных антител, антител к экстрагируемому ядерному антигену, антител к ДНК, антител к нуклеосомам и антифосфолипидных антител.
Материал для исследования: сыворотка крови.
Метод определения: метод лайн-блота раздельно выявляет антинуклеарные антитела к следующим антигенам: к Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа), SS-A (52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, dsDNA/Histone/Nucleosome, Rib P, AMA-M2, Jo-1 антигену.
Сроки исполнения: 3-5 рабочих дней.
Единицы измерения: интенсивность реакции пропорциональна содержанию аутоантител к конктетным антигенам, оценивается в крестах по результатам денситометрии.
Референсные значения: Антитела к Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа), SS-A (52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, dsDNA/Histone/Nucleosome, Rib P, AMA-M2, Jo-1 не обнаружены
Интерпретация:
Тест является полуколичественным, результат определения аутоантител представляется в «крестах» для каждого антигена. Увеличение степени серопозитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител. Варианты результата оценки серопозитивности приведены ниже:
- - антитела не обнаружены
+ - низкое содержание аутоантител к специфическому антигену.
++ - среднее содержание аутоантител к специфическому антигену.
+++ - высокое содержание аутоантител к специфическому антигену.
Часты случаи обнаружения в одном биоматериале нескольких специфичностей антинуклеарных антител.
Основные заболевания, связанные с выявление антинуклеарных антител приведены в следующей таблице:
|
Антиген антинуклеарных антител |
Клинико-диагностическое значение выявления аутоантител к антигену |
|
Sm (Smith) |
Антитела к Sm антигену являются специфическим маркером системной красной волчанки (входит в 10 критерий СКВ 1997 года). |
|
SS-A (Ro52) |
Неспецифичный серологический маркер многих аутоиммуных заболеваний. Антитела отмечаются при различных аутоиммунных заболеваниях, чаще при системной красной волчанке и ее кожных формах, системных ревматических заболеваниях, ревматоидном артрите, аутоиммунных заболеваниях печени и т.д.. |
|
SS- A (Ro60) |
Антитела отмечаются при классической системной красной волчанке (обычно с другими антителами), изолированно отмечаются при кожных формах красной волчанки, фоточувствительности. При выявлении антител к SSA у беременной, которая больна СКВ, обнаружение антител указывает на высокий риск врожденной красной волчанки у новорожденного. Основной серологический показатель при синдроме Шегрена. Нередко антитела выявляются совместно с антителами к SS-A (Ro52) антигену. |
|
SS-B |
Синдром Шегрена (обычно вместе с SSA), системная красная волчанка. |
|
PCNA |
Системная красная волчанка, риск волчаночного нефрита. |
|
Рибосомы (Ribo P) |
Системная красная волчанка, риск поражения центральной нервной системы. |
|
Нуклеосомы |
Системная красная волчанка, высокий риск волчаночного гломерулонефрита. |
|
Двуспиральная ДНК |
Специфический маркер системной красной волчанки (входит в 10 критерий СКВ 1997 г), высокий риск волчаночного нефрита. |
|
snRNP/Sm |
Смешанное заболевание соединительной ткани, системная красная волчанка с низким риском поражения почек, склеродермия. |
|
Гистоны |
Системная красная волчанка, лекарственная волчанка, склеродермия. |
|
Scl-70 |
Системный склероз с диффузным поражением кожи и внутренних органов. |
|
PM-Scl |
Склеродермия, сопровождающаяся полимиозитом. |
|
CENT-B |
CREST синдром со склеродактилией, телангиэктазиями, подкожными кальцинатами, синдромом Рейно, эзофагитом. |
|
Jo-1 |
Полимиозит в виде антисинтетазного синдрома. |
|
AMA-M2 |
Первичный билиарный цирроз, синдром Шегрена. |
Основная литература:
1. Лапин С.В. Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний/ Издательство «Человек», СПб - 2010.
2. Насонов Е.Л., Александрова Е.Н. Современные стандарты лабораторной диагностики ревматических заболеваний. Клиническиерекомендации/ БХМ, М - 2006.
3. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Organ Specific Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2011.
4. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Systemic Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2007.
5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science – 2006.
6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Diagnostic Criteria in Autoimmune Diseases / Humana Press – 2008.
7. Инструкции к набору реагентов.