Системные ревматические заболевания
Иммуноблот антинуклеарных антител при склеродермии (код 01.02.15.535)
Комбинированный тест, включающий обнаружение антител к антигенам Scl-70, СENP-A, CENP-B, RP-11, RP-155, фибрилларин, NOR 90, Th/To, PM-Sc100, PM-Scl75, Ku, PDGFRи Ro-52, а также титры антинуклеарного фактора на клеточной линии НЕр2. Тест используется для диагностики и дифференциальной диагностики основных форм диффузной склеродермии (системного склероза).
Описание теста:
Диффузная склеродермия (системный склероз) относится к числу системных заболеваний соединительной ткани. Основными клиническими проявлениями системного склероза является тяжелое фибротическое поражение кожи и нарушения микроциркуляции. Нередко развивается поражение внутренних органов, включая фиброз легких, поражение пищевода, сердца, почек. Как и другие системные ревматические заболевания, системная склеродермия сопровождается появлением в крови большого количества аутоантител. Лимитированная склеродермия и ее формы поражают преимущественно кожу, и аутоантитела отмечаются при ограниченном повреждении значительно реже.
Большинство аутоантител, которые отмечаются при склеродермии, относят к семейству антинуклеарных антител, которые связываются с рибонуклеиновыми кислотами, и ассоциированными с ними белками. У 90-95% пациентов со склеродермией выявляются высокие титры антинуклеарного фактора на клеточной линии НЕр2 (см. описание теста). Метод позволяет выявлять основные разновидности антинуклеарных антител при этом заболевании, включая антитела к Scl-70, СENPA, CENPB, RP11, RP155, фибрилларин, NOR90, Th/To, PM-Sc100, PM-Scl75, Ku, PDGFRи Ro-52 антигену.
У пациентов со склеродермией при положительном результате антинуклеарного фактора специфичность антинуклеарных антитела при помощи иммуноблота может быть установлена в 60-85% случаев. Отрицательный результат иммуноблота, в этом случае не исключает диагноза системной склеродермии. При склеродермии антитела отмечаются при особенной клинической картине заболевания, поэтому могут использоваться в оценке рисков специфических проявлений данного заболевания.
Подготовка к исследованию:
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется забор крови не ранее, чем через 4 часа после последнего приема пищи.
Показания к назначению теста:
1. Дифференциальная диагностика системных ревматических заболеваний;
2. Подозрение на диффузную склеродермию и ее разновидности;
3. Системный склероз;
4. CREST-синдром (Кальцинаты мягких тканей, синдром Рейно, Эзофагит, Склеродактилия, Телангиэктазии);
5. Лимитированная и локализованная склеродермия;
6. Склеродактилия;
7. Синдром Рейно неуточненной этиологии;
8. Фиброз легких и легочная гипертензия.
Материал для исследования: сыворотка крови.
Метод определения: метод лайн-блота раздельно выявляет антинуклеарные антитела к следующим антигенам: Scl-70, СENP A, CENP B, RP 11, RP 155, фибриллярин, NOR 90, Th/To, PM-Sc100, PM-Scl 75, Ku, PDGFR, Ro-52. Антинуклеарный фактор выявляется с помощью метода непрямой иммунофлюоресценции на клеточной линии НЕр-2.
Сроки исполнения: 5 рабочих дней.
Единицы измерения: интенсивность реакции пропорциональна содержанию аутоантител к конкретным антигенам, оценивается в крестах по результатам денситометрии.
Референсные значения: антитела к соответствующим белкам не обнаружены.
Интерпретация:
Тест является полуколичественным, результат определения аутоантител представляется в «крестах» для каждого антигена. Увеличение степени серопозитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител. Варианты результата оценки серопозитивности приведены ниже:
1. Отрицательный - антитела к соответствующим белкам не обнаружены.
2. + - сомнительный (низкое содержание аутоантител к специфическому антигену).
3. ++ - положительный (среднее содержание аутоантител к специфическому антигену).
4. +++ - сильноположительный (высокое содержание аутоантител к специфическому антигену).
Нередко в одном биоматериале могут быть выявлены нескольких специфичностей антинуклеарных антител.
Основные заболевания, связанные с выявление антинуклеарных антител при склеродермии приведены в следующей таблице:
|
Антиген аутоантител |
Значение |
|
Scl-70 |
Антигеном этих антител является топоизомераза I. Основной маркер системного склероза с проксимальной склеродермией и диффузным поражением кожи и внутренних органов. |
|
CENT-А |
Основной диагностический маркер одной из разновидностей диффузной склеродермии - CREST синдрома, представляющего сочетание склеродактилии, телангиэктазий, подкожных кальцинатов, синдрома Рейно и аутоиммунной фиброзирующего эзофагита. Иногда может отмечаться интерстициальное поражение легких. |
|
CENT-B |
CREST-синдром со склеродактилией, телангиэктазиями, подкожными кальцинатами, с-мом Рейно, эзофагитом. |
|
RP11/RP155 |
Антитела к РНК-полимеразам указывают на высокий риск вовлечения внутренних органов, включая почки и сердце. |
|
Фибриллярин |
Специфичный маркер склеродермии, обуславливает ядрышковый тип антинуклеарного фактора на клетках Нер2, при системных формах указывает на вовлечение внутренних органов. |
|
NOR90 |
Антиген ядрышкового типа свечения антинуклеарного фактора, специфичного для склеродермии. |
|
Th/To |
Антитела к этому антигену отмечаются при лимитированных кожных формах склеродермии, отмечается взаимосвязь с поражением легких. |
|
PM-Scl 100/75 |
Маркер перекрестного синдрома, сочетающего симптоматику склеродермии и полимиозита, могут встречаться при идиопатическом полимиозите. Нередко отмечается при артрите и поражении пищевода. Часто встречаются при склеродермии у детей. |
|
Ku |
Маркер сочетания склеродермии и полимиозита. Встречаются при системной красной волчанке, синдроме Шегрена и других системных ревматических заболеваниях, часто ассоциирован с полимиозитом. Сочетается с легочной гипертенизией. |
|
PDGFR |
Крайне редкий, но специфичный маркер склеродермии. |
|
SS-A (Ro52) |
Отмечается при различных аутоиммунных заболеваниях, чаще при системной красной волчанке и ее кожных формах, системных ревматических заболеваниях, ревматоидном артрите, аутоиммунных заболеваниях печени, инфекционных заболеваниях и т.д. |
Основная литература:
1. Лапин С.В. Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний/ Издательство «Человек», СПб - 2010.
2. Насонов Е.Л., Александрова Е.Н. Современные стандарты лабораторной диагностики ревматических заболеваний. Клиническиерекомендации/ БХМ, М - 2006.
3. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Organ Specific Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2011.
4. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Systemic Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2007.
5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science – 2006.
6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Diagnostic Criteria in Autoimmune Diseases / Humana Press – 2008.
7. Инструкции к набору реагентов.