Определение активности глюкозо-6 фосфатдегидрогеназы в крови

Дефицит активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) является одной из наиболее распространенных наследственных причин гемолитической анемии, относится к ферментопатиям. Наследуется сцепленно с Х-хромосомой по рецессивному типу. Гемолитические кризы преимущественно характерны для лиц мужского пола. Дефект данного фермента часто встречается у населения Средиземноморья, Азии, Африки, Латинской Америки. На территории РФ определяется приблизительно у 2% населения, дефицит Г-6-ФДГ наиболее распространен среди лиц армянской и азербайджанской национальности. Кроме того, носительство патологического гена описано у таджиков, грузин, русских.

Дефицит активности Г-6-ФДГ возникает в результате наследственных мутаций в гене G6PD, располагающегося в Xq28. Описано более 190 различных мутаций в различных этнических группах. Самые частые мутации AURES, MEDITERRANEAN, A-, SIBARI, VIANGCHAN и ANANT.

Г-6-ФДГ – фермент, запускающий глиголиз по пентозофосфатному пути, способствует восстановлению NADP до NADPH, который необходим для образования восстановленного глутатиона, являющегося антиоксидантом. При недостаточности Г-6-ФДГ происходит снижение энергетических запасов клеток, что в свою очередь приводит к денатурации гемоглобина (формируются тельца Гейнца-Эрлиха) и белков, входящих в состав клеточной мембраны. Поврежденные клетки элиминируются в селезенке, там они теряют часть своей поверхности, после чего быстро распадаются в кровеносном русле (внутрисосудистый гемолиз). При этом жизненный цикл эритроцитов не превышает 30 суток (в норме 3-3.5 месяца).

По данным ВОЗ, выделяют пять типов нарушения функции Г-6-ФДГ, среди которых только первые три являются дефицитным состоянием:

I – тяжелый дефицит с хронически протекающей анемией (активность Г-6-ФДГ<10%);

II – тяжелый дефицит с эпизодами гемолиза (активность Г-6-ФДГ<10%);

III – умеренный дефицит с гемолитическими кризами на фоне воздействия стрессорного фактора (10%<активность Г-6-ФДГ<60%);

IV – легкий дефицит с отсутствием симптоматики (60%<активность Г-6-ФДГ<100%);

V – повышенная активность без клинических проявлений (активность Г-6-ФДГ>100%).

Спровоцировать гемолитический криз могут экзогенные факторы (описано более 40 медикаментов, к их числу относятся сульфаниламиды, нестероидные противовоспалительные препараты, салицилаты, производные витамина K, хинолоны и др., а также вирусы и бактерии, в литературе описаны случаи длительного воздействия ультрафиолетового облучения, перегревания и переохлаждения) и эндогенные факторы (ацидоз различного генеза – при сахарном диабете, печеночной недостаточности, преэклампсии). У лиц с врожденным дефектом фермента Г-6-ФДГ, при этом разрушение эритроцитов будет носить эпизодический характер.

Клиническая картина гемолитического криза: в тяжелых случаях у больных появляются высокая температура, резкая слабость, боли в животе и спине, рвота. Отмечаются выраженная одышка, сердцебиение, нередко развитие коллаптоидного состояния. Характерным симптомом является выделение темной мочи, иногда черного цвета, что связано с внутрисосудистым распадом эритроцитов и выделением с мочой гемосидерина. В некоторых случаях вследствие закупорки почечных канальцев продуктами распада гемоглобина и резкого снижения клубочковой фильтрации возможно развитие острой почечной недостаточности. При объективном исследовании отмечается желтушная окраска кожных покровов и слизистых оболочек, увеличение селезенки, реже печени. Примерно через неделю гемолиз прекращается.

При исследовании крови — нормохромная выраженная анемия, ретикулоцитоз, в мазке крови много нормоцитов и телец Гейнца. Определяются специфические формы разрушенных эритроцитов – дегмациты («укушенные» клетки). Осмотическая стойкость эритроцитов в норме или повышена. Повышается содержание свободного билирубина в крови.

Фавизм – развитие острого гемолитического криза у некоторых лиц с дефицитом Г-6-ФДГ в ответ на употребление в пищу конских бобов или попадание в легкие пыльцы этого растения. Картина гемолитического криза развивается уже через несколько часов после употребления этих бобов, часто сопровождается тяжелым гемолизом с развитием почечной недостаточности. Гемолиз, спровоцированный цветочной пыльцой этих бобов, развивается через несколько минут после контакта с ней, протекает легко.

Диагностика основана на оценке уровня Г-6-ФДГ, хотя во время острого гемолиза результаты теста часто ложноотрицательные из-за наличия ретикулоцитов, в которых содержится больше Г-6-ФДГ, чем в более старых клетках.