Нарушение сперматогенеза (AZF-бесплодие)

Азооспермия является наиболее тяжелой формой патозооспермии и характеризуется отсутствием сперматозоидов в эякуляте при не менее чем двухразовом исследовании центрифугированной семенной жидкости. Азооспермия выявляется у 1% всего мужского населения и у 10—15% инфертильных мужчин.

Проведение генетического тестирования на наличие микроделеций в локусе AZF Y-хромосомы является необходимым как при прогнозировании мужского бесплодия и его лечения, так и при планировании терапевтических процедур.
Микроделеции факторов азооспермии на длинном плече Y-хромосомы — наиболее часто встречающиеся генетические изменения при азооспермии и тяжелой форме олигозооспермии; они являются одной из главных причин мужского бесплодия. Наиболее часто микроделеции обнаруживаются в субрегионе AZFc — до 72%, в субрегионе AZFb — 15—16% случаев, в субрегионе AZFa — в 5—6%. Комбинация микроделеций во всех субрегионах встречается почти у 14— 17% пациентов. У подавляющего числа мужчин с микроделециями AZF-локуса верифицируется первичное бесплодие, и в 80—85% — азооспермия.
В 2014 г. были опубликованы рекомендации по молекулярно-биологической диагностике нарушений сперматогенеза, выпущенные под эгидой Европейской академии андрологии (European Academy of Andrology, EAA) и Европейской сетью качества молекулярно-генетических исследований (European Molecular Genetics Quality Network, EMQN), которые включали базовый и расширенный алгоритмы обследования бесплодных мужчин. Базовый алгоритм содержит 6 основных STS-маркеров: по 2 маркера на каждый субрегион локуса AZF, а расширенный алгоритм, который используют в случае обнаружения микроделеций в локусе AZF базовым методом, содержит дополнительные 13 STS-маркеров, с помощью которых возможно установить точные границы и длины делетированных областей субрегионов локуса AZF, имеющих важное клиническое значение.
Делеции в локусе AZFа, как правило, приводят к полному отсутствию сперматогониев, и в сперматогенной ткани присутствуют только клетки Сертоли. В локусе AZFb основная роль принадлежит семейству генов RBMY, входящему в состав мультигенного семейства, имеющего РНК-связывающий домен. Ген RBMY экспрессирует белок, который контролирует сплайсинг в сперматогенных клетках. Делеции гена RBMY приводят к блокированию сперматогенеза на стадии мейоза.
Регион AZFc локализован в дистальной части длинного плеча Y-хромосомы и содержит несколько генов и генных семейств, представленных многими копиями, которые экспрессируются только или преимущественно в яичках. В этом участке Y-хромосомы локализованы в среднем 4 копии гена DAZ (основной ген-кандидат на «фактор азооспермии» в регионе AZFc), а также копии RBM, CDY и других генов. Описано большое число различных типов частичных AZFc –делеций (gr/gr, b1/b3, b2/b3, b3/b4 и др), а также их подтипов. В отличие от полных, частичные AZF-делеции характеризуются различной степенью влияния на сперматогенез и фертильность — от азооспермии до нормозооспермии.
У пациентов с делецией в локусе AZFс имеет место широкая вариабельность клинических проявлений: от олигоспермии до полного отсутствия сперматогенных клеток. Важно отметить, что в этом случае степень регрессии сперматогенного эпителия увеличивается с возрастом. Делеция гена DAZ приводит к блокированию сперматогенеза на стадии пахитены.
Известно, что вероятность обнаружения сперматозоидов при биопсии яичка у пациентов с микро-делециями в локусе AZF различна. Делеции AZFc (и частично AZFb) связаны с успешным поиском сперматозоидов примерно в 50% случаев, а в случае наличия у пациента полной делеции AZFa или AZFb (или AZFb+c) вероятность нахождения зрелых сперматозоидов фактически равна нулю.

 
Интерпретация:
Исследование микроделеций AZF локуса Y-хромосомы у мужчин с тяжелой формой олигозооспермии и азооспермии позволяет установить генетическую причину нарушения сперматогенеза и является важным диагностическим и прогностическим критерием, определяющим рациональную тактику лечения, выбор метода преодоления бесплодия, а также прогнозировать вероятность получения сперматозоидов для проведения экстракорпорального оплодотворения, в частности интрацитоплазматической инъекции сперматозоида в ооцит.
Согласно руководству Laboratory guidelines for the molecular diagnosis of Y-chromosomal microdelesion (EMQN) (1999 г.), для проведения данного вида исследований рекомендуется использовать определенные STS-маркеры (sequence-tagged sites – высококонсервативные уникальные последовательности ДНК), локализованные на длинном плече Y-хромосомы в различных областях AZF-локуса. Отсутствие у пациента какого-либо маркера или группы маркеров свидетельствует о делеции соответствующей области AZF-локуса.