Антитела к гладким мышцам (F-актину) методом нРИФ на тройном субстрате

Выявление антител к гладким мышцам используется в диагностике аутоиммунного гепатита. Антитела к гладким мышцам (АГМА) реагируют с миофиламентами в цитоплазме гладкомышечных клеток, основным из которых является фибрилларин (F-актин). Существует несколько видов антител к гладким мышцам, в том числе к фибриллярному (F-) актину, тубулину и десмину. Среди них только антитела к F-актину являются маркером аутоиммунного гепатита, в то время как антитела к тубулину, десмину и виментину встречаются при ревматических заболеваниях и вирусных инфекциях и самостоятельного клинического значения не имеют. Актин представляет собой глобулярный белок массой 46 кДа, который составляет основную массу микрофиламентов эукариотической клетки. Актин может существовать как в мономерной (М-), так и полимеризованной фибриллярной (F-) форме. Аутоантитела при аутоиммунном гепатите реагируют только с F-формой этого белка. Связывание аутоантител зависит от конформации эпитопов, поэтому выделение F-актина в нативном виде затруднено. В связи с этим основным методом выявления антител к F-актину является непрямая иммунофлюоресценция, которая позволяет максимально сохранить аутоантиген.

Антитела к гладким мышцам с помощью иммунофлюоресценции были впервые выявлены у пациентов с хроническим активным гепатитом (Johnson et al., 1965), который впоследствии получил название «аутоиммунный гепатит». Антитела к гладким мышцам, направленные против F-актина, рассматриваются в качестве наиболее чувствительного маркера аутоиммунного гепатита 1 типа, хотя их встречаемость при этом заболевании составляет только 50-70%. В большинстве случаев они выявляются совместно с антинуклеарным фактором. В 10% случаев антитела к гладким мышцам могут отмечаться при первичном билиарном холангите. Антитела к гладким мышцам класса IgA часто встречаются у больных с целиакией. Антитела к гладким мышцам практически не встречаются на фоне вирусных гепатитов.

В сыворотке крови больных с аутоиммунным гепатитом 1 типа обычно выявляются антитела к гладким мышцам, антинуклеарный фактор и высокие уровни гамма-глобулинов, преимущественно иммуноглобулина IgG. При 2 типе аутоиммунного гепатита выявляются антитела к микросомам печени-почек.  Выявление этих серологических маркеров аутоиммунного гепатита входит в действующие критерии Международной группы по изучению аутоиммунного гепатита 2008. Выявление любого из этих маркеров в высоком титре (≥ 1:80) в сочетании с высокой гипергаммаглобулинемией необходимо для постановки диагноза аутоиммунный гепатит. Важным дополнительным маркером аутоиммунного гепатита является выявление антител к асиалогликопротеиновому рецептору (ASGPR), которые отмечаются в дебюте заболевания, и их концентрация повышается при обострении заболевания.

Интерпретация:

• Обнаружение высоких титров антител (>1:80) к гладким мышцам, направленных против F-актина, указывает на высокую вероятность аутоиммунного гепатита 1 типа. Антитела к гладким мышцам отмечаются у 40-60% пациентов с аутоиммунным гепатитом. Выявление антигладкомышечных антител входит в международные клинико-лабораторные критерии аутоиммунного гепатита 1999 года, наряду с выявлением антинуклеарного фактора и гипергаммаглобулинемией. Низкие титры могут встречаться при системных ревматических заболеваниях, ревматоидном артрите и целиакии.

• Отсутствие аутоантител не исключает диагноз аутоиммунный гепатит. В диагностике аутоиммунных заболевания печени может быть рекомендовано дообследование с помощью выявления антител к митохондриям, антител к микросомам печени-почек, антител к асиалогликопротеиновому рецептору (ASGPR), и панели аутоантител при аутоиммунных заболеваниях печени.