Исследование генетических полиморфизмов, ассоциированных с риском развития тромбофилии

Тромбофилия — это нарушения гемостаза и гемореологии, характеризующиеся повышенной склонностью к развитию тромбозов или внутрисосудистого свертывания.

Проявления тромбофилии связаны с образованием тромбов в венах и/или артериях, которые нарушают работу внутренних органов, вследствие чего у больных развивается повышенный риск осложнений беременности, хирургических операций, чаще наблюдается формирование тромбоэмболий и ишемических поражений органов.

Заболевание обусловлено генетической или приобретенной патологией клеток крови, а также дефектами свертывающей системы крови. В 30-50% случаев причиной является генетическая предрасположенность, обусловленная мутациями в генах F2, F5, F7, F13, FGB (плазменное звено системы гемостаза) и ITGA2, ITGB3, PAI-1 (сосудисто-тромбоцитарное звено), которые приводят к аномальному синтезу компонентов системы гемостаза или нарушению функциональной активности.

 Генетический анализ позволяет выявить полиморфизмы генов факторов и компонентов системы гемостаза, что позволяет на раннем этапе оценить риски развития тромбоэмболии, тромбозов, сердечно-сосудистой патологии, а также акушерско-гинекологических осложнений.

Интерпретация

Во время исследования проводят определение наличия полиморфизмов в генах FGB, FII (протромбин), FV (мутация Лейдена), FVII, FXIII, ITGA2, ITGB3 и PAI-1, на основании чего делается заключение о наличии протромбогенного и протективного генотипа. 

• Исследование полиморфизма 20210 G>A в гене F2, кодирующий протромбин: 

Мутация гена протромбина заключается в замене гуанина на аденин в позиции нуклеотида 20210 (20210 G>А)  в нетранслируемой области гена, что приводит к увеличению уровня протромбина на 30%. Таким образом, генотип G/A и А/А может вносить вклад в состояние гиперкоагуляции.

• Исследование 1691G>A полиморфизма в гене F5, кодирующем проакцелерин (мутация Лейдена): 

Замена гуанина на аденин в 1691 позиции гена фактора V (1691G>A)  приводит к синтезу мутантного активированного фактора V. Фактор V выполняет функцию ко-фактора при превращении протромбина в тромбин фактором Х.  Мутация Лейдена является основной причиной резистентности к протеину С, так как приводит к  замещению в молекуле  фактора V аминокислоты аргинина на глутамин в положении 506, в месте, где он расщепляется естественным антикоагулянтом – протеином С.  Это замещение предотвращает инактивацию фактора V активированным белком C. Мутация Лейдена обладает огромным протромбогенным потенциалом. У носителей генотипа G/А и А/А риск тромбозов возрастает в 7 раз, а на фоне приема гормональных контрацептивов - еще в 6-9 раз.

• Исследование полиморфизма  807 C>T в гене ITGA2, кодирующем интегрин (тромбоцитарный рецептор к коллагену): 

Ген ITGA2 кодирует белок интегрин α2β1, является частью основного тромбоцитарного рецептора GPIa/GPIIa, который связывается с субэндотелиальным коллагеном и играет важную роль в адгезии и активации тромбоцитов. Наличие генотипов С/Т и Т/Т влияет на экспрессию, функцию и иммуногенность компонентов адгезивных рецепторов тромбоцитов и приводит к умеренному увеличению скорости адгезии тромбоцитов и, таким образом, может быть генетическим фактором риска тромбоза.

• Исследование полиморфизма 1565 T>C в гене ITGB3, кодирующем интегрин (тромбоцитарный рецептор к фибриногену): 

Ген ITGB3 кодирует белок интегрин бета-3 – мембранный гликопротеин, известный как тромбоцитарный гликопротеин IIIа (GP IIIа). На мембране тромбоцитов GPIIIa образует комплекс с GPIIb, представляющий собой тромбоцитарный рецептор фибриногена. Рецептор IIb/IIIa играет важную роль в развитии сердечно-сосудистых заболеваний. Тромбоциты носителей генотипов C/Т и Т/Т имеют значимо повышенную склонность к агрегации, что может являться причиной увеличения риска тромбообразования.

• Исследование полиморфизма -675 5G>4G в гене PAI-1, кодирующем серпин: 

• Исследование полиморфизма 10976 G>A в гене  F7, кодирующем проконвертин: 

Полиморфизм 10976 G>A  располагается в гене фактора VII и является результатом однократного замещения гуанина аденином, что  приводит к замене  аргинина на глутамин в кодируемом белке. Циркулирующий фактор VII связывается с тканевым фактором и активируется до фактора VIIa. Высокий уровень фактора VII в крови связывают с повышенным риском смерти при инфаркте миокарда.  Генотипы G/A и А/А приводят к значимому понижению экспрессии гена фактора VII и являются защитным фактором в развитии тромбозов и инфаркта миокарда. При исследовании пациентов со стенозом коронарных артерий и инфарктом миокарда было обнаружено, что наличие аллели А приводит к понижению уровня фактора VII в крови на 30% и 2-х кратному понижению риска инфаркта миокарда даже при наличии заметного коронарного атеросклероза.

• Исследование полиморфизма 103 G>T в гене F13 А1, кодирующем фибриназу: 

Ген F13 A1 кодирует A субъединицу фактора XIII, последний фермент, генерируемый в каскаде свертывания крови, который образует внутримолекулярные сшивки   между молекулами фибрина и гамма-глутамил-эпсилон-лизина и, таким образом, стабилизирует кровяные сгустки. C/T и Т/Т генотипы приводят к замене аминокислоты, расположенной близко к сайту активации тромбина, значимо увеличивая скорость активации фактора XIIIа тромбином и приводя к аномальной структуре сгустка фибрина.  Данный полиморфизм обладает протективным эффектом относительно развития инфаркта миокарда и тромбоза глубоких вен.

1. Ткаченко О. Ю., Лапин С. В., Мазинг А. В., Лазарева Н. М., Шмонин А. А., Соловьев Л. Н., Бондарева Е. А., Сельков С. А., Чепанов С. В., Тотолян А. А. Сравнительный анализ иммунологических методов детекции антифосфолипидных тел.  Клиническая лабораторная диагностика №1 2017, стр.: 40 – 44
2. Г. А. Березовская, Н. Н. Петрищев, Л. П. Папаян, М. А. Карпенко, О. А. Смирнова, Т. В. Лазовская, О. С. Напалкова. Интенсивность образования тромбина у больных ишемической болезнью сердца после коронарного стентирования. Специализированный медицинский журнал Атеротромбоз, 2–2015. 
3. О. С. Напалкова, В. Л. Эмануэль, М. А. Карпенко, Т. В. Вавилова, Г. А. Березовская, А. Н. Яковлев, В. А. Юдина, Е. Ю. Васильева, С. В. Лапин, А. В. Тишков. Тест генерации тромбина в оценке риска повторной операции реваскуляризации миокарда. Тромбоз, гемостаз и реология, № 1 (65), февраль 2016 г.
4. Veronica Mezhov , Julian D. Segan , Huyen Tran, Flavia M Cicuttini. Antiphospholipid syndrome: a clinical review. Med J Aust. 2019 Aug 211(4):184-188.
5. Соловьева Л.Н., Шмонин А.А., Эмануэль Ю.В., Столяров М.С., Бондарева Е.А., Мазинг А.В., Лазарева Н.М., Холопова И.В., Блинова Т.В., Харитонова Т.В., Лапин С.В., Эмануэль В.Л., Мельникова Е.В. Клинико-лабораторные маркеры атеросклероза у пациентов с атеротромботическим инсультом.  Клиническая лабораторная диагностика. 2015. №10. С.12-16.
6. Karen Schreiber, Savino Sciascia, Philip G. de Groot, Katrien Devreese, Soren Jacobsen, Guillermo Ruiz-Irastorza, Jane E. Salmon, Yehuda Shoenfeld, Ora Shovman, Beverley J. Hunt . Antiphospholipid syndrome. Nature Reviews Disease Primers volume 4, Article number: 17103 (2018)