Комплексное молекулярно-генетическое исследование при тромбофилии (гены F2, F5, F7, F13, FGB, ITGA2, ITGB3, PAI-1)

Тромбофилия — это нарушения гемостаза и гемореологии, характеризующиеся повышенной склонностью к развитию тромбозов или внутрисосудистого свертывания.

Проявления тромбофилии связаны с образованием тромбов в венах и/или артериях, которые нарушают работу внутренних органов, вследствие чего у больных развивается повышенный риск осложнений беременности, хирургических операций, чаще наблюдается формирование тромбоэмболий и ишемических поражений органов.

Заболевание обусловлено генетической или приобретенной патологией клеток крови, а также дефектами свертывающей системы крови. В 30-50% случаев причиной является генетическая предрасположенность, обусловленная патогенными вариантами в генах F2, F5, F7, F13, FGB (плазменное звено системы гемостаза) и ITGA2, ITGB3, PAI-1 (сосудисто-тромбоцитарное звено), которые приводят к аномальному синтезу компонентов системы гемостаза или нарушению функциональной активности.

 Генетический анализ позволяет выявить полиморфизмы генов факторов и компонентов системы гемостаза, что позволяет на раннем этапе оценить риски развития тромбоэмболии, тромбозов, сердечно-сосудистой патологии, а также акушерско-гинекологических осложнений.

Интерпретация

Во время исследования проводят определение наличия полиморфизмов в генах FGB, FII (протромбин), FV (мутация Лейдена), FVII, FXIII, ITGA2, ITGB3 и PAI-1, на основании чего делается заключение о наличии протромбогенного и протективного генотипа. 

• Исследование полиморфизма 20210 G>A в гене F2, кодирующий протромбин: 

Аберрация в гене протромбина заключается в замене гуанина на аденин в позиции нуклеотида 20210 (20210 G>А)  в нетранслируемой области гена, что приводит к увеличению уровня протромбина на 30%. Таким образом, генотип G/A и А/А может вносить вклад в состояние гиперкоагуляции.

• Исследование 1691G>A полиморфизма в гене F5, кодирующем проакцелерин (мутация Лейдена): 

Замена гуанина на аденин в 1691 позиции гена фактора V (1691G>A)  приводит к синтезу мутантного активированного фактора V. Фактор V выполняет функцию ко-фактора при превращении протромбина в тромбин фактором Х.  Мутация Лейдена является основной причиной резистентности к протеину С, так как приводит к  замещению в молекуле  фактора V аминокислоты аргинина на глутамин в положении 506, в месте, где он расщепляется естественным антикоагулянтом – протеином С.  Это замещение предотвращает инактивацию фактора V активированным белком C. Мутация Лейдена обладает огромным протромбогенным потенциалом. У носителей генотипа G/А и А/А риск тромбозов возрастает в 7 раз, а на фоне приема гормональных контрацептивов - еще в 6-9 раз.

• Исследование полиморфизма  807 C>T в гене ITGA2, кодирующем интегрин (тромбоцитарный рецептор к коллагену): 

Ген ITGA2 кодирует белок интегрин α2β1, является частью основного тромбоцитарного рецептора GPIa/GPIIa, который связывается с субэндотелиальным коллагеном и играет важную роль в адгезии и активации тромбоцитов. Наличие генотипов С/Т и Т/Т влияет на экспрессию, функцию и иммуногенность компонентов адгезивных рецепторов тромбоцитов и приводит к умеренному увеличению скорости адгезии тромбоцитов и, таким образом, может быть генетическим фактором риска тромбоза.

• Исследование полиморфизма 1565 T>C в гене ITGB3, кодирующем интегрин (тромбоцитарный рецептор к фибриногену): 

Ген ITGB3 кодирует белок интегрин бета-3 – мембранный гликопротеин, известный как тромбоцитарный гликопротеин IIIа (GP IIIа). На мембране тромбоцитов GPIIIa образует комплекс с GPIIb, представляющий собой тромбоцитарный рецептор фибриногена. Рецептор IIb/IIIa играет важную роль в развитии сердечно-сосудистых заболеваний. Тромбоциты носителей генотипов C/Т и Т/Т имеют значимо повышенную склонность к агрегации, что может являться причиной увеличения риска тромбообразования.

• Исследование полиморфизма -675 5G>4G в гене PAI-1, кодирующем серпин: 

• Исследование полиморфизма 10976 G>A в гене  F7, кодирующем проконвертин: 

Полиморфизм 10976 G>A  располагается в гене фактора VII и является результатом однократного замещения гуанина аденином, что  приводит к замене  аргинина на глутамин в кодируемом белке. Циркулирующий фактор VII связывается с тканевым фактором и активируется до фактора VIIa. Высокий уровень фактора VII в крови связывают с повышенным риском смерти при инфаркте миокарда.  Генотипы G/A и А/А приводят к значимому понижению экспрессии гена фактора VII и являются защитным фактором в развитии тромбозов и инфаркта миокарда. При исследовании пациентов со стенозом коронарных артерий и инфарктом миокарда было обнаружено, что наличие аллели А приводит к понижению уровня фактора VII в крови на 30% и 2-х кратному понижению риска инфаркта миокарда даже при наличии заметного коронарного атеросклероза.

• Исследование полиморфизма 103 G>T в гене F13 А1, кодирующем фибриназу: 

Ген F13 A1 кодирует A субъединицу фактора XIII, последний фермент, генерируемый в каскаде свертывания крови, который образует внутримолекулярные сшивки   между молекулами фибрина и гамма-глутамил-эпсилон-лизина и, таким образом, стабилизирует кровяные сгустки. C/T и Т/Т генотипы приводят к замене аминокислоты, расположенной близко к сайту активации тромбина, значимо увеличивая скорость активации фактора XIIIа тромбином и приводя к аномальной структуре сгустка фибрина.  Данный полиморфизм обладает протективным эффектом относительно развития инфаркта миокарда и тромбоза глубоких вен.

UPD: Полиморфизмы генов F7, F13, FGB, ITGA2, ITGB3, PAI-1 ранее считались значимыми в плане оценки риска тромбозов и тромбоэмболических осложнений, однако в настоящее время показано отсутствие изолированной клинической значимости аберраций в данных генах, либо клинической информации недостаточно [6]. Вместе с тем, отдельные научные исследования показали суммирующий эффект полиморфизмов разных генов, кодирующих факторы свёртывающей и противосвертывающей системы крови, в плане развития тромбозов.