Определение антинейрональных антител методом нРИФ

Антинейрональные антитела представляют собой целое семейство аутоантител, направленных против онконейрональных антигенов – антигенов нервной ткани, эктопически экспрессированных в опухолевой ткани. Образование антинейрональных антител лежит в основе развития паранеопластических неврологических синдромов (ПНС). У пациентов с ПНС развивается неврологическая симптоматика, которая напрямую связана с воздействием антител на собственную нервную ткань и не вызвана  прямой инвазией опухоли, метастазированием или последствиями лечения. Т.е. клинические проявления ПНС не связаны с объемным процессом, ассоциированным с опухолевым ростом. Развитие паранеопластического синдрома встречается лишь у 1% онкологических больных, а специфические антитела могут выявляться за несколько лет до выявления самого опухолевого процесса. При этом, поражения могут затрагивать любую область нервной системы, включая центральную, периферическую и вегетативную нервную систему. В некоторых случаях антинейрональные антитела могут встречаться у пациентов на фоне вирусной инфекции (постинфекционные аутоиммунные энцефалиты), после вакцинации (поствакцинальные аутоиммунные энцефалиты) или в отсутствие какой-либо причины (непаранеопластические аутоиммунные энцефалиты).В связи с этим, все антинейрональные антитела можно разделить на 3 группы: 1) антитела, строго ассоциированные с опухолями (антиамфифизиновые, анти-CV2 (CRMP5), анти-Hu(ANNA-1), анти-Ma2, антирековериновые, анти-Ri (ANNA-2), анти-Yo (PCA-1)); 2) антитела, частично ассоциированные с опухолями (ANNA-3, анти-mGluR1, анти-Tr, анти-Zic4, PCA-2); 3) антитела, ассоциированные как с опухолями, так и с другими состояниями (антиацетилхолиновые (анти-AchR), антиникотиновые AchR (анти-nAchR), антитела к потенциалзависимым кальциевым каналам (анти-VGCC), антитела к потенциалзависимым калиевым каналам (анти-VGPC)).

Мишенью антинейрональных антител могут становиться различные нейрональные структуры:

• внутриклеточные антигены, локализованные в цитоплазме (Yo, CV2 (CRMP5), Ма2) или в ядрах (Hu , Ri) нейрональных клеток;

• синаптические рецепторы или компоненты транссинаптических белковых комплексов (Anti-AMPA, Anti-CASPR2, Anti-LGI1, Anti-DPPX, Anti-GABA);

• компоненты синаптических везикул пресинаптических терминалей (амфифизин, GAD);
  

Антитела, направленные на внутриклеточные структуры, не вызывают прямого повреждения нейронов и лишь указывают на опосредованный Т-клетками иммунный ответ против соответствующих нейрональных антигенов. В свою очередь антитела, направленные против поверхностных антигенов, оказывают прямое патогенетическое воздействие на нейрональные структуры, которое сопровождается различного рода неврологическими расстройствами. Таким образом, выявление антинейрональных антител у пациентов с неврологическими проявлениями может быть полезным для ранней диагностики онкологических заболеваний и позволяет начать своевременное лечение.

Метод нРИФ с использованием тканевых субстратов мозжечка, гиппокампа и печени крысы является основным скрининговым методом в выявлении антинейрональных антител. Исследование можно проводить как в сыворотке крови, так и в цереброспинальной жидкости (ЦСЖ). Метод нРИФ позволяет выявлять несколько типов свечения на тканевых субстратах, в зависимости от того, какие антитела присутствуют в биообразцах пациента и с какими структурами нейрональных тканей они взаимодействуют:         

• Антитела к клеткам Пуркинье мозжечка

Характеризуется специфическим свечением цитоплазмы клеток Пуркинье и/или их дендритных отростков и встречается у пациентов при выявлении анти-Yo (PCA-1), PCA-2, анти-Tr (Dner), анти-CARP (anti-carbonic anhydrase-related protein VIII), Anti-ITPR1 (Anti-Sj) антител.

• Ядерный нейрональный тип свечения

Характеризуется специфическим гранулярным свечением клеток зернистого слоя мозжечка и встречается у пациентов с анти-Hu (ANNA-1), анти-Ri (ANNA -2) и анти-ZIC4 (Zinc finger protein) антителами.

• Рецепторный тип свечения

Характеризуется специфическим свечением молекулярного слоя мозжечка и встречается у пациентов с NMDA, AMPA, GABAb, LG1, CASPR2 и DPPX антител.

• Ядрышковый нейрональный тип свечения

Характеризуется специфическим точечным свечением ядрышек нейрональных клеток и встречается у пациентов с Ma1 и Ma2/Ta антителами.

• Цитоплазматический нейрональный тип свечения

Характеризуется специфическим мелкоклеточным или пятнистым свечением зернистого слоя мозжечка и встречается у пациентов с антителами к СV2, GAD и амфифизину.

У пациентов с паранеопластическими синдромами антинейрональные антитела встречаются в высоких титрах в сыворотке и ЦСЖ у 50-70% пациентов. При выявлении антител методом нРИФ может быть дополнительно рекомендовано выявление антител методом иммуноблота, антител к вольтаж-зависимым калиевым каналам, антител к NMDA-рецептору, антител к амфифизину, антител к GAD, антител к скелетным мышцам.

Референсные значения:

• <1:100

Интерпретация:

• Отрицательный результат выявления антинейрональных антител в значительной степени исключает наличие таких неврологических нарушений, как паранеопластический энцефаломиелит, паранеопластическая сенсорная нейропатия, паранеопластическая мозжечковая дегенерация, паранеопластическая атаксия опсоклонус миоклонус, синдром «ригидного человека» (stiff person syndrome). Тест может быть отрицательным у пациентов с неврологическими нарушениями на фоне паранеопластического процесса, находящихся в глубокой иммуносупрессии, связанной с гуморальным дефицитом, тяжелыми соматическими заболеваниями или под действием медикаментозной терапии.

• Выявление свечения клеток Пуркинье чаще всего встречается у пациентов с подострой дегенерацией мозжечка в сочетании с дизартрией и мозжечковой атаксией, у пациентов с лимбическим энцефалитом, миастенией Ламбертона-Итона, автономной нейропатией, моторной нейропатией, а также с лимфомой Ходжкина. Данные антитела могут быть ассоциированы с такими заболеваниями, как мелкоклеточная карцинома легких, новообразования яичников, карцинома молочной железы, карцинома матки и меланома. Данный тип свечения наиболее часто встречается при наличии anti-Yo антител.

• Рецепторный тип свечения нейронов встречается при следующих неврологических расстройствах: анти-NMDA энцефалит, лимбический энцефалит, нейромиотония, синдром Морвана, энцефаломиелит. Эти антитела ассоциированы с такими заболеваниями, как мелкоклеточная карцинома легких, злокачественная тимома, карцинома легких, карцинома молочной железы, овариальная тератома, тестикулярная тератома, карцинома щитовидной железы, карцинома почек, карцинома матки. Наиболее часто данный тип свечения встречается при наличии NMDA, LG1, CASPR2 антител.

• Ядрышковый нейрональный тип свечения чаще всего выявляется у пациентов со стволовым энцефалитом, лимбическим энцефалитом и ассоциирован с такими заболеваниями, как мелкоклеточная карцинома легких, карцинома яичка и карцинома молочных желез. Наиболее часто данный тип свечения встречается при наличии Ma1, Ma2/Ta антител.

• Цитоплазматический нейрональный тип свечения чаще всего выявляется у пациентов со следующими неврологическими расстройствами: сенсорная и автономная нейропатия, энцефалит, экстрапирамидный моторный синдром, мозжечковая дегенерация, синдром мышечной скованности и лимбический энцефалит. Данные антитела могут быть ассоциированы с мелкоклеточной карциномой легких, тимомой, карциномой молочной железы. Наиболее часто данный тип свечения выявляется при наличии антител к амфифизину и GAD.

• Ядерный нейрональный тип свечения чаще всего выявляется у пациентов с синдромом опсоклонус-миоклонуса в сочетании с мозжечковой атаксией, синдромом «танцующих» глаз, энцефалопатией, энцефаломиелитом, подострой сенсорной нейропатией и автономной нейропатией в сочетании с такими неврологическими проявлениями, как: возбуждение, спутанное сознание, амнезия, сопровождающаяся деменцией. Данные антитела могут быть ассоциированы с мелкоклеточным раком легких, карциномой молочной железы и нейробластомой. Чаще всего данный тип свечения встречается при наличии таких антинейрональных антител, как anti-Hu и anti-Ri.

В некоторых случаях встречается атипичное свечение нейрональных структур, выявление которого возможно при наличии антител, мишени которых еще не описаны. Данные антитела могут встречаться у пациентов на фоне паранеопластического синдрома и других аутоиммунных заболеваний.