Исследование активности протеазы ADAMTS-13

Металлопротеиназа ADAMTS13 представляет собой одну из цинк-содержащих металлопротеаз, входящую в широкое семейство протеаз соединительной ткани, обладающих структурной гомологией с антикоагулянтами животных ядов (дезинтегринов) и белком матрикса соединительной ткани (тромбоспондином), что определяет ее название. В отличие от большинства протеаз плазмы, ADAMTS13 вырабатывается гепатоцитами в активном состоянии и устойчива к действию большинства естественных ингибиторов протеаз плазмы. Функцией ADAMTS13 в плазме крови является расщепление мультимеров фактора Виллебранда в целевом сайте протеолиза, что регулирует его активность и препятствует чрезмерному тромбообразованию в мелких сосудах. Фактор Виллебранда вырабатывается в эндотелии, мегакариоцитах и субэпителиальной соединительной ткани, его высвобождение и полимеризация является ключевой частью сосудисто-тромоцитарного гемостаза.

Недостаток активности ADAMTS-13 приводит к тромботической тромбоцитопенической пурпуре. Тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (ТТП, болезнь Мошковица) – редкое жизнеугрожающее заболевание, характеризующееся неиммунной микроангиопатической (механической) гемолитической анемией, тромбоцитопенией, петехиями и гематомами, гипербилирубинемией, реже лихорадкой, почечными и неврологическими нарушениями. Возраст дебюта заболевания широко варьирует, от конгенитальных и детских до поздних форм заболевания. Монофазная форма обычно имеет иммуно-опосредованную причину, хронические возвратные формы обычно наследственные.

Функциональный дефект ADAMTS13 может быть обусловлен либо мутацией в активном центре, либо наличием аутоантител, эти антитела называют ингибитором ADAMTS-13. В соответствии с этиопатогенозом тромботическую тромбоцитопеническую пурпуру подразделяют на аутосомно-рецессивную врожденную форму (синдром Апшоу–Шульмана) и иммунно-опосредованную форму заболевания. Протеаза состоит из нескольких функциональных доменов, при этом мутации затрагивают преимущественно протезную активность фермента, но дефекты могут дополнять друг друга (ко-доминантное наследование). Дефекта фермента недостаточно чтобы спровоцировать клинические симптомы заболевания, поэтому симптоматика проявляется на фоне инфекции, беременности или интоксикации, в ситуациях которые приводят к массированному высвобождению фактора Виллебранда.

Проявления тромбоцитопенической пурпуры требуют дифференциальной диагностики с фульминантными инфекциями, диссеминированным внутрисосудистым свертыванием, аутоиммунной гемолитической анемией, синдром Эванса, гемолитико-уремическим синдромом, HELLP синдромом, пре-эклампсией, гепарин-индуцированной тромбоцитопенией, антифосфолипидным синдромом и рядом более редких жизнеугрожающих состояний с нарушением свертывания.

Референсные значения: 40-130% (0,4-1,4 IU/ml)

Интерпретация результата

Диагноз тромботической тромбоцитопенической пурпуры подтверждается при снижении активности ADAMTS-13 в плазме менее 10%. Механизм снижения может зависеть от уровня ингибирующих аутоантител, титры которых могут меняться на фоне изменения тяжести состояния. Наличие функционального дефицита активности ADAMTS-13 в отсутствие симптоматики заболевания требует проведения молекулярно-генетического тестирования для подтверждения наследственной формы. Переливание плазмы способно восстанавливать активность фермента в течении недели после инфузии, однако, поскольку время его полужизни в плазме составляет 2-4 дня, активность ADAMTS-13 быстро снижается. Для исключения наследственной формы тромботической тромбоцитопенической пурпуры может быть рекомендовано молекулярно-генетическое исследование гена ADAMTS-13.