Цена исследования
2 650 ₽
Срок выполнения:
5 рабочих дней
Код ПМУ:
01.02.15.745
Добавить

Генодиагностика миотонической дистрофии 1 типа (ген DMPK)

Цена исследования
2 650 ₽
Срок выполнения:
5 рабочих дней
Код ПМУ:
01.02.15.745
Добавить
Показания:
  • Подозрение на миотоническую дистрофию 1 типа на основе клинических проявлений;
  • Семейный анамнез миотонической дистрофии 1 типа;
  • Дифференциальная диагностика системных проявлений, ассоциированных с неврологической симптоматикой;
  • Дифференциальная диагностика мышечной слабости и гипотонии;
  • Дифференциальная диагностика миодистрофии;
  • Планирование семьи.
Биоматериал:
Венозная кровь в вакуумной пробирке с ЭДТА, фиолетовая крышка, от 2 мл
Подготовка к исследованию:
Специальной подготовки не требуется. Исследование проводится натощак (не принимать пищу 3 часа до исследования, можно пить воду).
Исследуемые показатели:
Количество CTG-повторов в гене DMPK
Метод измерения:
Фрагментный анализ
Единицы измерения:
Количество CTG-повторов в гене DMPK

Миотоническая дистрофия 1 типа (МД1) представляет собой аутосомно-доминантную наследственную миотоническую дистрофию, ассоциированную со множественными системными нарушениями. 

Распространенность МД1 составляет около 1:20,000 населения.

В основе патогенеза данного заболевания лежит гетерозиготная экспансия CTG-повторов в 3'-нетранслируемом, но транскрибируемом участке гена DMPK, расположенного на длинном плече 19-ой хромосомы (19q13.32), который кодирует миотонин протеинкиназу (МПК). Нормальное количество CTG-повторов на данном участке составляет менее 34. Экспансия от 35 до 49 CTG-тринуклеотидных повторов является умеренной (премутация), клинических проявлений при данном количестве повторов не описано, однако имеется риск увеличения размера экспансии при передаче ее потомству. Диагноз МД1 подтверждается в случае, когда экспансия составляет 50 и более повторов. Известно, что размер экспансии коррелирует с тяжестью клинической картины и временем появления первых симптомов. При наиболее тяжелых формах заболевания, в том числе – при врожденной, описаны аллели, содержащие до 6500 повторов. Также для данного заболевания характерен феномен антиципации, который характеризуется утяжелением симптоматики и более ранним дебютом заболевания у потомков при передаче патогенной аллели из поколения в поколение. Обусловлен данный феномен нестабильностью экспансии и возможностью увеличения ее размера в процессе гаметогенеза.

Продукт гена DMPK – белок МПК экспрессируется повсеместно, однако наиболее распространен в гладкой и скелетной мускулатуре, а также в клетках миокарда. В норме данный белок вовлечен во множество биологических процессов, в том числе – в фосфорилирование белков, транспорт ионов натрия и кальция, регуляцию сердечной проводимости и сократимости скелетных мышц. При МД1 с гена DMPK транскрибируется мутантный мРНК-транскрипт, содержащий CUG-повторы, которые формируют структуры по типу «шпилек». Данные структуры связываются с белками семейства MBNL (muscleblind-like), участвующими в сплайсинге, и аккумулируются в виде внутриядерных включений. Таким образом, экспансия в гене DMPK приводит к нарушению регуляции сплайсинга ряда генов. Кроме того, в основе патогенеза, вероятно, играет роль приобретенная токсичность мутантного транскрипта.

Повсеместная распространенность белка МПК объясняет широкую вариабельность фенотипов заболевания. Клинические проявления МД1 включают нарушения со стороны многих органов и систем, включая скелетную и гладкую мускулатуру, органы зрения, эндокринную, сердечно-сосудистую и центральную нервную системы. Спектр фенотипов включает легкую, классическую и врожденную (конгенитальную) формы заболевания. Легкая форма характеризуется наличием катаракты и легкой миотонии, дебютирует в возрасте от 20 до 70 лет, а продолжительность жизни пациентов с данной формой заболевания не изменена. Количество повторов при легкой форме составляет, как правило, 50-100. Классическая форма характеризуется мышечной слабостью, миотонией, катарактой, нарушениями сердечной проводимости и ритма. Данная форма заболевания проявляется раньше – в возрасте 10-30 лет и является инвалидизирующей. Для классической формы типична экспансия размером 100-1000 CTG-тринуклеотидных повторов. Врожденная, или конгенитальная, форма, в свою очередь, характеризуется тяжелой гипотонией и генерализованной мышечной слабостью с рождения. Также для этой формы характерны частые респираторные осложнения и ранний летальный исход. Большинство пациентов с врожденной формой МД1 имеют аллель, содержащую экспансию более 1000 повторов. Кроме того, МД1 классифицируют на основе возраста дебюта заболевания и выделяют конгенитальную, младенческую, ювенильную, взрослую формы, а также МД1 с поздним началом.

Интерпретация

Диагностика МД1 основана на выявлении экспансии тринуклеотидных CTG-повторов в 3'-нетранслируемом участке гена DMPK, расположенного на длинном плече 19-ой хромосомы.

Заболевание наследуется по аутосомно-доминантному типу, то есть имеется 50% риск развития заболевания при наследовании патогенной аллели от одного из родителей. Для миотонической дистрофии 1 типа характерен феномен антиципации. Кроме того, пенетрантность заболевания довольно высокая и достигает 100% к 50 годам. Размер экспансии коррелирует с тяжестью симптоматики, уровнем пенетрантности и временем первых проявлений заболевания. Известно, что размер экспансии может увеличиваться во время гаметогенеза, что в ряде случаев приводит к наследованию экспансии с большим количеством повторов, утяжелению симптоматики и более раннему дебюту заболевания у потомков.

Наличие экспансии тринуклеотидных CTG-повторов в локусе 19q13.32 определяется с помощью методов ПЦР-тройных повторов и фрагментного анализа, в соответствии с рекомендациями American College of Medical Genetics от 2014 года, а также European Molecular Genetics Quality Network от 2013.

Критерии оценки CТG-повторов по результатам фрагментного анализа

Количество CТG-повторов
Диагностическая значимость
менее 34 – нормальные аллели
МД1 исключен
35-49 – умеренное увеличение
МД1 исключен, есть риск развития у потомства
50-149 – умеренная экспансия
МД1 подтвержден. Асимптоматичное течение, легкая и классическая формы; повышенный риск развития у потомства
≥150 – выраженная экспансия

МД1 подтвержден.

Классическая, ювенильная и конгенитальная формы; повышенный риск развития у потомства.


Цена исследования
2 650 ₽
Использованная литература:
1. Владыкина А.В., Назаров В.Д., Краснов В.С., Королева Е.И., Федорова П.А., Мошникова А.Н., Мазинг А.В., Лапин С.В., Эмануэль В.Л., Руденко Д.И., Стучевская Ф.Р., Затаковенко С.М., Павлова Т.А., Алексеева Т.М., Голдобин В.В. Исследование диагностической значимости тяжелых цепей нейрофиламентов в цереброспинальной жидкости при боковом амиотрофическом склерозе. Анналы клинической и экспериментальной неврологии 2021
2. Алексеева Т.М., Стучевская Т.Р., Демешонок В.С. Боковой амиотрофический склероз: механизмы патогенеза и новые подходы к фармакотерапии (обзор литературы). Нервно-мышечные болезни 2018
3. P. Masrori and P. Van Damme. Amyotrophic lateral sclerosis: a clinical review. European Journal of Neurology 2020, 27: 1918–1929
4. Nick S. Verber, Stephanie R. Shepheard, Matilde Sassani, Harry E. McDonough, Sophie A. Moore, James J. P. Alix, Iain D. Wilkinson, Tom M. Jenkins and Pamela J. Shaw. Biomarkers in Motor Neuron Disease: A State of the Art Review. Front. Neurol., 03 April 2019.
5. Сычева А.М., Назаров В.Д., Лапин С.В. и др. Оптимизация преаналитического этапа обработки материаладля проведения гистохимического исследования биоптатов скелетной мышцы в диагностике нервно-мышечных заболеваний. Нервно-мышечные болезни 2019
Меню