Цена исследования
2 650 ₽
Срок выполнения:
6 рабочих дней
Код ПМУ:
01.02.15.740
Добавить

Генодиагностика миотонической дистрофии 2 типа (ген CNBP)

Цена исследования
2 650 ₽
Срок выполнения:
6 рабочих дней
Код ПМУ:
01.02.15.740
Добавить
Показания:
  • Подозрение на миотоническую дистрофию 2 типа на основе клинических проявлений;
  • Семейный анамнез миотонической дистрофии 2 типа;
  • Дифференциальная диагностика мышечной слабости и гипотонии;
  • Дифференциальная диагностика миодистрофии;
  • Дифференциальная диагностика системных проявлений, ассоциированных с неврологической симптоматикой;
  • Планирование семьи.
Биоматериал:
Венозная кровь в вакуумной пробирке с ЭДТА, фиолетовая крышка, от 2 мл
Подготовка к исследованию:
Специальной подготовки не требуется.
Исследуемые показатели:
Количество CCTG-повторов в первом интроне гена CNBP (ZNF9)
Метод измерения:
Фрагментный анализ
Единицы измерения:
Количество тетрануклеотидных CCTG-повторов в первом интроне гена CNBP (ZNF9)

Миотоническая дистрофия 2 типа (МД2) представляет собой наследственное мультисистемное заболевание, главным клиническим проявлением которого является миотония и проксимальная мышечная слабость. Частота встречаемости составляет примерно 9:100,000 человек в европейской популяции.

Причиной развития МД2 является гетерозиготная экспансия тетрануклеотидного повтора CCTG в комплексе (TG)n(TCTG)n(CCTG)n в первом интроне гена CNBP (ранее известного, как ZNF9), располагающегося на длинном плече 3 хромосомы в локусе 3q21 и кодирующего цинк-пальцевый белок 9 (ЦПБ9).

Общая длина комплекса (TG)n(TCTG)n(CCTG)n в норме варьирует от 104 до 176 нуклеотидов. Количество CCTG-повторов в норме составляет от 11 до 26 и может прерываться единичными последовательностями типа TCTG и GCTG. На патогенных аллелях гена CNBP происходит экспансия исключительно CCTG-повторов, без их прерывания вышеназванными последовательностями. Считается, что количество повторов в патологической экспансии варьирует от 75 до более 11,000. Нужно отметить, что последовательность (TG)n(TCTG)n, граничащая с CCTG-повторами, высоко полиморфна, и поэтому точное количество CCTG-повторов без проведения секвенирования определить невозможно. Интересно, что размер экспансии не коррелирует с тяжестью заболевания. Экспансии размером менее 30 CCTG-повторов являются стабильными. В более крупных экспансиях стабильность напрямую зависит от наличия прерывающих последовательностей. Таким образом, наличие длинных непрерывающихся повторов делает экспансию более нестабильной. Как и при МД1, нестабильность обусловливает не только гонадный, но и соматический мозаицизм. При этом мозаицизм может иметь место как в различных тканях, так и в клетках одной ткани. Вероятно, соматический мозаицизм лежит в основе увеличения количества повторов у одного пациента в течение жизни.

Считается, что патогенез МД2 во многом схож с МД1, в частности, при данном заболевании аналогично образуются мутантные мРНК-транскрипты, содержащие CCUG экспансии, и образующие внутриядерные рибонуклеарные включения совместно с белками-регуляторами сплайсинга из семейства MBNL и другими РНК-связывающими факторами. Таким образом, как и при МД1, нарушается сплайсинг целого ряда генов, что лежит в основе мультисистемного поражения. Кроме того, известно, что мутантные транскрипты приобретают токсические свойства.

Клинически МД2 проявляется преимущественно миотонией, проксимальной мышечной слабостью и миалгией. Более редкими являются проявления со стороны других органов и систем: задняя субкапсулярная катаракта, нарушение сердечного ритма и проводимости, сахарный диабет 2 типа. В большинстве случаев заболевание дебютирует в возрасте от 30 до 40 лет. На начальных стадиях поражаются преимущественно сгибатели шеи и пальцев рук, в последующем присоединяется слабость мышц бедра. Миотония, как правило, присутствует практически у каждого больного мышечной дистрофией 2 типа и проявляется непроизвольным сокращением какой-либо мышцы и ее избыточно медленным расслаблением. Врожденная форма данного заболевания отсутствует, в отличие от схожей патологии - миотонической дистрофии 1 типа.

Интерпретация

Диагностика миотонической дистрофии 2 типа основана на выявлении экспансии тетрануклеотидных CCTG-повторов в первом интроне гена CNBP (ZNF9), располагающегося на длинном плече 3 хромосомы и кодирующего цинк-пальцевый белок 9 (ЦПБ9).

Заболевание наследуется по аутосомно-доминантному типу. Таким образом, риск развития заболевания у потомков составляет 50% в случае наследования патогенной аллели от одного из родителей. Для МД2 не характерен феномен антиципации. Напротив, часто наблюдается феномен «обратной антиципации», при котором число повторов уменьшается при передаче мутации следующему поколению. Размер экспансии не коррелирует с тяжестью симптоматики и временем первых проявлений заболевания. Однако пенетрантность зависит от возраста и со временем достигает 100%. Размер экспансии может варьировать в пределах одной родословной вследствие гонадного мозаицизма. Также количество повторов может увеличиваться в течение жизни у одного индивидуума вследствие соматического мозаицизма.

Наличие экспансии тетрануклеотидных CCTG-повторов в локусе 3q21.3 определяется с помощью методов ПЦР-тройных повторов и фрагментного анализа, в соответствии с рекомендациями American College of Medical Genetics от 2014 года, а также European Molecular Genetics Quality Network от 2013.

Критерии оценки CСТG-повторов по результатам фрагментного анализа

Длина комплекса (TG)n(TCTG)n(CCTG)n
Диагностическая значимость
104-176 – нормальные аллели
МД2 исключен
177-372 – умеренное увеличение
МД2 исключен, есть риск развития у потомства
≥ 373 – выраженная экспансия
МД2 подтвержден; повышенный риск развития у потомства.

Цена исследования
2 650 ₽
Использованная литература:
1. Владыкина А.В., Назаров В.Д., Краснов В.С., Королева Е.И., Федорова П.А., Мошникова А.Н., Мазинг А.В., Лапин С.В., Эмануэль В.Л., Руденко Д.И., Стучевская Ф.Р., Затаковенко С.М., Павлова Т.А., Алексеева Т.М., Голдобин В.В. Исследование диагностической значимости тяжелых цепей нейрофиламентов в цереброспинальной жидкости при боковом амиотрофическом склерозе. Анналы клинической и экспериментальной неврологии 2021
2. Алексеева Т.М., Стучевская Т.Р., Демешонок В.С. Боковой амиотрофический склероз: механизмы патогенеза и новые подходы к фармакотерапии (обзор литературы). Нервно-мышечные болезни 2018
3. P. Masrori and P. Van Damme. Amyotrophic lateral sclerosis: a clinical review. European Journal of Neurology 2020, 27: 1918–1929
4. Nick S. Verber, Stephanie R. Shepheard, Matilde Sassani, Harry E. McDonough, Sophie A. Moore, James J. P. Alix, Iain D. Wilkinson, Tom M. Jenkins and Pamela J. Shaw. Biomarkers in Motor Neuron Disease: A State of the Art Review. Front. Neurol., 03 April 2019.
5. Сычева А.М., Назаров В.Д., Лапин С.В. и др. Оптимизация преаналитического этапа обработки материаладля проведения гистохимического исследования биоптатов скелетной мышцы в диагностике нервно-мышечных заболеваний. Нервно-мышечные болезни 2019
Меню