Молекулярно-генетическая диагностика наследственных заболеваний печени

1. Недостаточность альфа-1 антитрипсина (НА1АТ).

Альфа-1-антитрипсин (А1АТ) представляет собой синтезируемый печенью гликопротеин семейства ингибиторов сериновых протеиназ. Недостаточность А1АТ - это наследственное аутосомно-рецессивное заболевание, характеризующееся снижением концентрации и активности А1АТ и приводит к патологии легких и печени. В 95% случаев у пациентов с НА1АТ обнаруживаются патологические аллели PiZ или PiS в гене SERPINA1. Основными проявлениями недостаточности А1АТ являются цитолитический синдром, стеатогепатит, фиброз и цирроз печени, легочная эмфизема и хроническая обструктивная болезнь легких. Гетерозиготное носительство PiZ или PiS вызывает отложения А1АТ в гепатоцитах и ведет к гиперферментемии, гепатиту и фиброзу печени, особенно у детей.

Для диагностики заболевания используется тест 01.02.15.1255 Молекулярно-генетическое исследование при дефиците альфа-1-антитрипсина (аллели PiZ, PiS гена SERPINA1).

Рисунок 1. Поражение печени при дефиците А1АТ

2. Наследственный гемохроматоз (НГ).

Представляет собой спектр наследственных заболеваний, возникающих в результате аберраций в генах, участвующих в метаболизме ионов железа. В 85-90% случаев причиной НГ являются мутации в гене HFE (НГ 1 типа). Нарушение функции белка HFE приводит к повышению уровня ферритина и насыщенности трансферрина, а также повышенному отложению железа в паренхиме органов. Наследственный гемохроматоз 1 типа представляет собой аутосомно-рецессивное заболевание, наиболее часто к его развитию приводят генетические аберрации C282Y, H63D и S65C в гене HFE. Ранними симптомами НГ являются артралгия, хроническая усталость, импотенция у мужчин и аменорея у женщин, потеря волос, а также гепатомегалия, гиперпигментация кожных покровов и артрит. В дальнейшем у пациентов с НГ может развиваться тяжелое нарушение функций печени вплоть до цирроза, а также сахарный диабет 2 типа и кардиомиопатия. Обнаружение гомозиготной мутации C282Y, а также компаундной гетерозиготы HFE C282Y/H63D и C282Y/S65C подтверждает диагноз. Клиническая пенетрантность мутаций в гене HFE составляет 50-70%.

Для диагностики заболевания используется тест 01.02.15.1020 Молекулярно-генетическое исследование при наследственном гемохроматозе (варианты H63D, S65C, C282Y гена HFE).

Рисунок 2. Классический фенотип пациента с наследственным гемохроматозом

3. Болезнь Вильсона-Коновалова (БВК).

Представляет собой наследственное аутосомно-рецессивное заболевание, вызываемое различными видами генетических аберраций в гене ATP7B, которые приводят к избыточному накоплению ионов меди в паренхиме печени, головного мозга и других органов. Основной патогенетический механизм заболевания - чрезмерное поглощение меди из тонкой кишки и снижение выведения меди печенью. Основными клиническими проявлениями БВК являются поражение печени (желтуха, гепатит-подобные кризы, хроническая болезнь печени и фульминантный гепатит), а также неврологические (различные виды гиперкинезов, атаксия, дистония) и психиатрические нарушения (депрессия, дезорганизация личности, нарушение интеллектуальных функций). Кроме этого, отложение меди по периферии роговой оболочки наблюдается в 50%-60% у пациентов с «печеночным» фенотипом БВК и у 90% пациентов с неврологической симптоматикой. Исследование на 15 основных патогенных вариантов в гене ATP7B, характерных для Российской популяции, в большинстве случаев позволяет подтвердить или исключить диагноз БВК.

Для диагностики заболевания используется тест 01.02.05.320 Молекулярно-генетическое исследование при болезни Вильсона-Коновалова (15 патогенных вариантов гена ATP7B).

Рисунок 3. Кольца Кайзера-Флейшера (желтовато-зелёная или зеленовато-коричневая пигментация по периферии роговицы) при болезни Вильсона-Коновалова

4. Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП).

Хроническое заболевание печени, ассоциированное с метаболическим синдромом и инсулинорезистентностью, при котором более чем в 5% гепатоцитов определяется макровезикулярный стеатоз. Развивается у лиц, не злоупотребляющих алкоголем. Согласно современным представлениям, простой стеатоз и неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) представляют собой две отдельных формы заболевания с различным прогнозом. НАЖБП в настоящее время представляет собой самое распространенное хроническое неинфекционное заболевание печени и поражает от 25 до 30% взрослых. Заболевание может длительное время протекать доброкачественно и не вызывать никаких специфических проявлений у пациентов. Может прогрессировать вплоть до развития цирроза печени. Было показано, что нарушение метаболизма триглицеридов и их гидролиза, вызванное патогенным вариантом I148M в гене PNPLA3 является модификатором тяжести заболевания, он ассоциирован с риском развития НАСГ, цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Молекулярно-генетическое исследование позволяет прогнозировать риск перехода стеатогепатоза в стеатогепатит и злокачественного течения заболевания.

Тест 01.02.15.1180. Молекулярно-генетическое исследование при неалкогольной жировой болезни печени (вариант I148M гена PNPLA3)

Рисунок 4. Неалкогольная жировая болезнь печени.

5. Синдром Жильбера (СЖ).

Наследственное заболевание, связанное с нарушением захвата и конъюгации билирубина. Проявляется транзиторной гипербилирубинемией за счет неконъюгированной фракции билирубина, слабо выраженной желтухой, расстройствами стула, слабостью, быстрой утомляемостью. Распространенность СЖ составляет в популяции 3-12 %. Наиболее частой причиной данного заболевания является экспансия TA-повторов, в промоторной зоне гена UGT1A1, кодирующего фермент, ответственный за конъюгацию билирубина. Заболевание наследуется по аутосомно-рецессивному типу, то есть для постановки диагноза требуется наличие на двух аллелях более 7 ТА-повторов. В редких случаях экспансия на одной аллели также может привести к появлению симптомов. При количестве ТА-повторов на обеих аллелях гена UGT1A1 ≤6 диагноз СЖ исключен. Гомозиготное увеличение числа ТА-повторов (>6) в промотере гена UGT1A1, нарушает синтез белка и является причиной нарушения образования прямого (конъюгированного) билирубина. Генотип (7/7, 7/8, 8/7-ТА повторов) снижает число функционально активных молекул трансферазы на 70-80%, что нарушает механизм конъюгирования в печени и ведет к появлению гастроэнтерологической симптоматики и нарушению метаболизма ряда лекарств.

Для диагностики заболевания используется тест 01.02.15.760 Молекулярно-генетическое исследование при болезни Жильбера (количество ТА-повторов гена UGT1A1).

Рисунок 5. Желтушность кожи и склер при синдроме Жильбера

6. Комплексная диагностика наследственных заболеваний печени.

Для диффернциальной диагностики наиболее частых наследственных заболеваний печени (гемохроматоз, болезнь Вильсона-Коновалова, дефицит альфа-1-антитрипсина, неалкогольная жировая болезнь печени) рекомендуется комплексный тест. Его рекомендуется использовать у пациентов с цитолитическим синдромом, гепатитом неясной этиологии (криптогенным гепатитом) и циррозом, а также у пациентов с жировой печенью и высоким риском НАЖБП. Тест не включает в себя диагностику синдрома Жильбера (выполняется отдельно).

Тест 01.02.15.1120 Комплексное молекулярно-генетическое исследование при наследственных заболеваниях печени (наследственный гемохроматоз, болезнь Вильсона-Коновалова, дефицит альфа-1-антитрипсина, неалкогольная жировая болезнь печени) – гены HFE, ATP7B, SERPINA1, PNPLA3

Рекомендуемый объем обследования для пациентов с поражением печени
1. Биохимические маркеры поражения печени (АЛТ, АСТ, ЩФ, билирубин, ГГТП) 2. Маркеры гепатитов В и С 3. Серология аутоиммунных заболеваний печени (01.02.15.301) 4. Диагностика болезни Жильбера (01.02.15.760) 5. Комплексная диагностика наследственных заболеваний печени (наследственный гемохроматоз, болезнь Вильсона-Коновалова, дефицит альфа-1-антитрипсина, НАЖБП) (01.02.15.1120)