Электрофорез основных липидных фракций с расчетом содержания триглицеридов

Триглицериды представляют собой класс липидов (жиров), который является основным источником энергии в организме. В плазме крови триглицериды вместе с холестерином, белками и фосфолипидами циркулируют в составе водорастворимых высокомолекулярных комплексов – липопротеинов. Основные фракции липопротеинов представлены хиломикронами, липопротеинами низкой плотности (ЛПНП), липопротеинами очень низкой плотности (ЛПОНП) и липопротеинами высокой плотности (ЛПВП).  У некоторых больных присутствует патологическая фракция: Липопротеин (а), обнаружение которой увеличивает риск сердечно-сосудистых заболеваний в 2-3 раза. Частицы ЛП(а) обладают структурой ЛПНП, в которых дополнительно присутствует аполипопротеин(а), при этом уровень ЛП(а) изменяется независимо от холестерина ЛПНП.

Повышение сывороточного уровня триглицеридов часто связано с метаболическими заболеваниями (диабет, ожирение, нефротический синдром, гипотиреоз), а также может быть следствием генетических нарушений.  Гипертриглицеридемия является независимым фактором риска атеросклероза, при этом степень ее влияния на риск сердечно-сосудистых заболеваний зависит от распределения триглицеридов по фракциям. Чаще всего избыток триглицеридов аккумулируется в ЛПОНП. В этом случае в результате метаболического взаимодействия ЛПОНП с другими классами липопротеинов происходит обогащение триглицеридами ЛПВП, что приводит к уменьшению их антиатерогенных свойств. Кроме того, возрастает атерогенность ЛПНП за счёт образования ЛПНП малой плотности (small dense LDL), при этом уровень холестерина ЛПНП может оставаться нормальным. Поэтому у больных с острым коронарным синдромом часто определяется повышение уровня триглицеридов при нормальном уровне холестерина ЛПНП. При ряде генетических и метаболических нарушений ТГ аккумулируются в хиломикронах, что не приводит к образованию ЛПНП малой плотности и требует иного подхода к лечению. Характер распределения триглицеридов в липопротеинах рекомендуется определять до назначения гиполипидемической терапии.

Преимущества данного исследования:

Электрофорез является недорогим и доступным методом разделения липопротеинов, который позволяет провести прямое измерение триглицеридов в основных фракциях липопротеинов, а также  обнаружить ЛП(а) с порогом определения 30 мг/дл, который является независимым фактором риска атеротромбоза и сердечно-сосудистых заболеваний(1). По сравнению с ультрацентрифугированием, которое считается «золотым стандартом» разделения липопротеинов, электрофорез является быстрым и менее трудозатратным методом, при этом позволяет получить высокосопоставимые результаты(6,7). Метод характеризуется высокой внутрипостановочной (SD<0,8; CV<4,2) и межпостановочной воспроизводимостью (SD<0,9; CV<3,5).

Методика исследования:

Метод исследования представляет собой электрофорез сыворотки крови на агарозном геле. После процедуры разделения липопротеинов пластина с гелем обрабатывается красителем Суданом красным, который обеспечивает специфическое окрашивание липопротеинов. После окрашивания и обработки геля производится денситометрическое сканирование зон миграции образцов.. Параллельно с электрофорезом производится определение общей концентрации триглицеридов на биохимическом анализаторе. Результатом исследования является пофракционное определение абсолютного содержания триглицеридов во фракциях в нг/дл.

Референсные значения:

Интерпретация результатов

Концентрация триглицеридов в липопротеинах высокой плотности (ЛПВП):

• Понижение: Концентрация триглицеридов, входящих в состав фракции ЛПВП, снижена. Для ЛПВП характерна обратная взаимосвязь с риском развития сердечно-сосудистых заболеваний, их снижение может наблюдаться наследственных нарушениях обмена холестерина, семейной хиломикронемии, нефротическом синдроме, гипертиреозе, заболеваниях печени
• Повышение: повышение концентрации триглицеридов ЛПВП отражает либо суммарное повышение фракции ЛПВП (при соответствующем повышении холестерина ЛПВП), либо обогащение ЛПВП триглицеридами. Обогащение триглицеридами приводит к нарушению способности ЛПВП к обратному транспорту холестерина, т.е. уменьшению их антиатерогенных свойств.
• Норма: интерпретация не требуется

Концентрация триглицеридов в липопротеинах очень низкой плотности (ЛПОНП):

• Повышение: Обнаружено повышение концентрации триглицеридов, входящих в состав ЛПОНП. Повышение содержания ЛПОНП, может отражать преобладание потребления углеводов над утилизацией. Повышение фракции ЛПОНП может наблюдаться при таких наследственных нарушениях, как семейная комбинированная гиперлипидемия, дисбеталипопротеинемия, семейная гипертриглицеридемия, либо развиваться вторично при эндокринных заболеваниях, заболеваниях печени и почек, болезнях накопления гликогена и других метаболических нарушениях.
• Понижение: интерпретация не требуется
• Норма: интерпретация не требуется

Концентрация триглицеридов в липопротеинах низкой плотности (ЛПНП):

• Понижение: Обнаружено понижение концентрации триглицеридов, входящих в состав фракции ЛПНП. Значительное снижение уровня ЛПНП может наблюдаться при некоторых редких наследственных нарушениях липидного обмена: семейной гиперхиломикронемии, абеталипопротеинемия и гипобеталипопротеинемия.
• Норма: интерпретация не требуется
• Повышение: Обнаружено повышение концентрации триглицеридов в составе фракции ЛПНП. Высокое содержание триглицеридов может наблюдаться при изменении состава ЛПНП и их обогащении триглицеридами, реже – при увеличении количества частиц ЛПНП.

Концентрация триглицеридов в хиломикронах

• Норма: интерпретация не требуется;

• Обнаружение: В сыворотке крови обнаружены триглицериды хиломикронов, которые не должны обнаруживаться при соблюдении пациентом 12-14 часового режима голодания перед исследованием. Обнаружение хиломикронов натощак встречается при наследственных нарушениях: семейной гиперхиломикронемии, семейной гипертриглицеридемии, но также может встречаться при нефротическом синдроме, гипотиреозе, диабете, алкоголизме, панкреатите.

Концентрация триглицеридов в липопротеине (а)

• Норма: интерпретация не требуется;

• Обнаружение: В сыворотке крови обнаружена дополнительная фракция Lp(a) – липопротеин (а).  Lp(a) – представляет собой фракцию липопротеинов, похожих по составу на ЛНП и дополнительно содержащий белок аполипопротеин-а (Апо(а)), ковалентно соединённый с АпоВ. Lp(a) является патологической фракцией липопротеинов, обладающий наиболее сильными атерогенными свойствами. Выявление Lp(a) в 2-3 раза увеличивает вероятность возникновения ССЗ.

Достоверность теста при постановке диагноза

Тест обладает высокой достоверностью при постановке диагноза дислипидемии в сочетании с определением общего холестерина и холестерина основных фракций липопротеинов

Дополнительные исследования

Исследование рекомендуется сочетать с электрофорезом липидов с расчётом холестерина.