Диагностика васкулитов и поражения почек, антитела к цитоплазме нейтрофилов

Васкулиты представляют собой широкий спектр заболеваний имеющих разнообразную природу. Среди них первичные васкулиты имеют аутоиммунную этиологию, а другие процессы являются вторичными по отношению к опухолям, инфекциям и коагулопатиям.

На основании классификации Чаппелл Хилл 1994 г. прервичные васкулиты делят по калибру пораженных сосудов и механизму иммунологического поражения. Васкулиты крупных сосудов (аортоартериит, височный артериит, узелковый периартериит) связаны с поражением эндотелия. Этот процесс сопровождается появлением антител к эндотелию и выбросом цитокинов, приводящих к выраженному острофазовому ответу, в том числе увеличению СОЭ и СРБ. По выраженности острофазовый ответ при системных васкулитах похож на сепсис.

Гранулематозные васкулиты, такие как с-м Вегенера, сопровождаются появлением антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA), которые реагируют с белками азурофильных гранул цитоплазмы нейтрофилов. Некоторые бактериальные агенты (стафилококки), производящие суперантигены, могут играть роль в индукции аутоиммунных ответов. Воспаление приводит к экспрессии антигенов антинейтрофильных антител на поверхности лейкоцитов и эндотелия. Взаимодействие антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) с мишенями приводит к преждевременной дегрануляции нейтрофилов при их трансэндотелиальной миграции и образованию воспалительной гранулемы. Существует ряд исследованных антигенов антинейтрофильных антител, из которых важнейшими являются протеиназа-3 (ПР-3 или PR-3) и миелопероксидаза (МПО или MPO). При воспалительных заболеваниях кишечника антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA)  направлены против плохо изученных антигенов.

Поражения мельчайших сосудов или капилляриты (с-м Шонлейн-Геноха, криоглобулинемия) возникают под воздействием циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК),которые представлены полимерными иммуноглобулинами и недостаточно растворимы. Так, резкое снижение растворимости ЦИК при криоглобулинемии на фоне охлаждения является причиной кожной пурпуры, артралгий, полиневрита и гломерулонефрита. При капилляритах целесообразно исследовать белки комплемента и антитела к ним. Биопсия кожи, при капилляритах позволяет обнаружить специфические отложения иммуноглобулинов в стенках мелких сосудах.

Тест 01.02.15.395 Антитела к эндотелиальным клеткам (HUVEC)

Антигенные мишени антиэндотелиальных антител невозможно очистить или синтезировать, поэтому основным методом выявления данных аутоантител является нРИФ на клетках эндотелия пуповины человека (HUVEC). Исследуется титр антител и у 70% больных с васкулитами крупных и средних сосудов отмечается положительный результат обнаружения антител. Антитела к эндотелию могут иметь перекрестную реакцию с антикардиолипиновыми антителами.

Тест 01.02.15.010 Антинейтрофильные цитоплазматические антитела (АНЦА или ANCA)

Основной тест для выявления антинейтрофильных антител является нРИФ с исследованием титра и типа свечения цитоплазмы клетки. Выделяют два основных типа свечения антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA) – цитоплазматический (характерный для с-ма Вегенера) и перинуклеарный (характерный для других васкулитов и воспалительных заболеваний кишечника). Для описания типов свечения антител к нейтрофилов обычно используются сокращения – цАНЦА и пАНЦА. Кроме того, при выявлении антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) могут быть обнаружены антитела против ядер нейтрофилов или редкий тип свечения хАНЦА. При обнаружении положительного результата обнаружения АНЦА необходимо определить антигенную специфичность антител. Целесообразно выявлять АНЦА совместно с АНФ (тест 01.02.15.035), так как последние могут маскировать АНЦА, а также АНФ, АНЦА и РФ в качестве скрининга васкулитов и ревматической патологии (тест 01.02.15.020).

• Тест 01.02.15.140 Антитела к протеиназе 3 (ПР3 или PR-3)

• Тест 01.02.15.135 Антитела к миелопероксидазе (МПО или MPO)

• Тест 01.02.15.415 Панель антител к антигенам цитоплазмы нейтрофилов (АНЦА)

В азурофильных гранулах цитоплазмы нейтрофилов находится ряд белков, которые осуществляют микробицидные и бактерицидные функции этих клеток. Антитела к ним играют большое значение в диагностике васкулитов, поражений печени и заболеваний кишечника.

Антиген	Заболевание
Протеиназа-3	С-м Вегенера
Миелопероксидаза	Микроскопический полиагнгиит, гломерулонефрит
Катепсин G	СКВ, ревматоидный артрит, ВЗК (б. Крона, НЯК)
Эластаза	Быстропрогрессирующий гломерулонефрит, СКВ, РА
Белок BPI	Муковисцидоз, заболевния легких
Лактоферрин	Склерозирующих холангит, воспалительные заболеваний кишечника, аутоиммунный панкреатит, ВЗК, ревматоидный артрит

Тест 01.02.15.365 Антитела к С1q фактору комплемента

Системая комплемента представляет собой группу сывороточных белков, которые совместно с иммуноглобулинами разрушают клеточные стенки бактерий и мембраны клеток, пораженных вирусами. Антитела к C1qфактору комплемента способны стабилизировать С1-конвертазу и приводить к выраженной активации системы комплемента. В результате страдает стенка капилляров и развивается кожный геморрагический гипокомплементемический васкулит. Антитела к С1q встречаются у 20-30% больных при системной красной волчанке, преимущественно при волчаночном нефрите, и у 60% при иммунокомплексных васкулитов различной этиологии.

Тест 01.02.15.150 Определение криоглобулинов с активностью ревматоидого фактора

Криоглобулины отмечаются при криоглобулинемических васкулитах (криоглобулинемиях). Выделяют простую криоглобулинемию, при которой криоглобулины представлены моноклональными иммуноглобулинами одного класса. При смешанной криоглобулинемии в составе криопреципитата обнаруживаются иммуноглобулины двух классов, из которых один имеет активность ревматоидного фактора. В результате данного теста исследуется наличие криоглобулинов, оценивается криокрит (% от объема сыворотки) и активность РФ в преципитате. Для корректного обследования необходимо обратить внимание на строгие температурные условия забора крови и доставки биоматериала в лабораторию.

01.02.15.085 Антитела к базальной мембране клубочка (NC1 домен коллагена IV типа)

Антигеном антител к базальной мембране почек является коллаген IV типа из которого состоит базальная мембрана клубочка и базальная мембрана альвеол легких. Появление антител сопровождается развитием почечно-легочного синдрома с-ма Гудпасчера. Типичным его проявлением является быстропрогрессирующий гломерулонефрит и альвеолит. Для диагностики поражений почек и легких при васкулитах рекомендуется сочетанное выявление АНФ, АНЦА и антител к базальной мембране (АНФ, АНЦА, ат к БМК) – тест 01.02.15.095.