1. Введение:
- Спикер: Сергей Владимирович Лапин, руководитель лаборатории по диагностике аутоиммунных заболеваний (Санкт-Петербург).
- Автоиммунные заболевания – это группа состояний, когда иммунная система атакует собственные ткани организма. Их распространенность растет, и они влияют не только на здоровье отдельных людей, но и на общество в целом. Лабораторная диагностика играет ключевую роль в выявлении и лечении этих заболеваний. Молекулярная медицина помогает глубже понять и лечить автоиммунные заболевания.
2. Аутоиммунитет и его диагностика:
- Аутоиммунные заболевания (АИЗ) поражают различные органы и системы.
- Диагностика основана на выявлении характерных аутоантител.
- Антинуклеарные антитела (АНА) – ключевой маркер системных АИЗ, но также встречаются у здоровых людей.
3. Антинуклеарный фактор (АНФ): разнообразие типов свечения:
- АНФ – антитела к компонентам ядра клетки.
- Различные типы свечения АНФ (гомогенный, гранулярный, центромерный и др.) ассоциированы с определенными АИЗ.
- Определение типа свечения помогает в дифференциальной диагностике.
4. Алгоритм диагностики аутоиммунных заболеваний:
- Первичный скрининг включает определение АНФ.
- При положительном результате проводят иммуноблот для выявления специфических антител.
- Комплексное обследование помогает дифференцировать различные АИЗ (системная красная волчанка, склеродермия, миозиты и др.).
5. Заключение:
- Лабораторная диагностика, основанная на выявлении аутоантител, играет важную роль в диагностике и дифференциации аутоиммунных заболеваний.
- Комбинирование различных методов (иммунофлюоресценция, иммуноблот) позволяет улучшить диагностическую точность.
Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Мазинг А.В., Тотолян А.А. Русскоязычная адаптация международной номенклатуры типов свечения ядра и цитоплазмы клетки (ICAP) для стандартизации выявления антинуклеарного фактора. Медицинская иммунология. 2020;22(6):1195-1214. https://doi.org/10.15789/1563-0625-RVO-2067
Цель. Определить частоту выявления атеросклероза, уточнить характер атеросклеротического поражения брахиоцефальных артерий у больных системной склеродермией (ССД), выявить основные факторы, влияющие на данный процесс.
Материал и методы. Обследованы 38 больных ССД. Определяли показатели сосудистой жесткости на участке сонная артерия — бедренная артерия, инструментальные и лабораторные характеристики функции эндотелия, морфологию сонных артерий, показатели липидного спектра, глюкозы, мочевой кислоты, N-терминального мозгового натрийуретического пептида (NT-proBNP), спектр антинуклеарных аутоантител, концентрацию цитокинов и хемокинов в сыворотке крови.
Результаты. Повышение толщины комплекса интима-медиа (ТКИМ) зафиксировано у 79% (n=30/38) обследованных больных ССД. У одного из обследованных пациентов выявлена окклюзия сонной артерии в области бифуркации. Различная степень стенозирования просвета артерии (20-70%) — у 52,6% (n=20/38) больных.
Определена взаимосвязь между ТКИМ и отдельными классическими факторами риска (ФР) атеросклероза (возрастом, уровнем гликемии). Среди неклассических ФР, обнаружена взаимосвязь между ТКИМ и уровнями асимметричного диметиларгинина, растворимой формой молекулы адгезии эндотелия сосудов (sVCAM), мочевой кислоты, NT-proBNP, аутоантителами к белкам центромер. При множественном регрессионном анализе наиболее информативными предикторами ТКИМ оказались возраст больных, уровни мочевой кислоты, sVCAM, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, интерлейкин-1.
Заключение. У больных ССД в генезе атеросклероза определенный удельный вес принадлежит неклассическим ФР, в первую очередь медиаторам воспаления, а также характерным для ССД метаболическим нарушениям (урикемия). Это может указывать на существование особого сочетания патогенетических механизмов поражения артериальной стенки у больных ССД, и может претендовать на повторную оценку состояния ТКИМ у больных ССД, с использованием большей выборки пациентов и дополнительных методов исследования.
Маслянский А.Л., Колесова Е.П., Козленок А.В., Пенин И.Н., Васильева Е.Ю., Ротарь О.П., Лазарева Н.М., Лапин С.В., Сысоев К.А., Солнцев В.Н., Баженов А.Н., Конради А.О. РОЛЬ МЕДИАТОРОВ ВОСПАЛЕНИЯ В ФОРМИРОВАНИИ АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ КРУПНЫХ АРТЕРИЙ У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИЕЙ. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2015;14(3):4-11. https://doi.org/10.15829/1728-8800-2015-3-4-11
Термином антинуклеарные антитела (АНА) называют семейство аутоантител к компонентам клетки, которые реагируют с нуклеиновыми кислотами ядра клетки и ассоциированными с ними белками. Для исследования АНА в клинической лаборатории может быть использовано множество диагностических тестов, основанных на разных принципах. Несмотря на важность выявления АНА, до недавнего времени не существовало международных рекомендаций, регламентирующих методы выявления АНА в клинической лабораторной диагностике. Международные рекомендации по выявлению АНА были опубликованы недавно (Ann Rheum Dis. 2014;73:17–23). В статье обсуждаются рекомендации и анализируется собственный опыт разработки лабораторных алгоритмов по выявлению АНА.
Актуальность. Жесткость артериальной сосудистой стенки является независимым предиктором кардиоваскулярной смерти среди различных популяций пациентов. В настоящее время проведено несколько исследований, результаты которых свидетельствуют о повышении жесткости артериальной стенки при системной склеродермии (ССД). Влияние иммуносупрессивной терапии на жесткость сосудистой стенки у больных ССД не исследовано.
Материалы и методы. Авторами данной статьи выполнена оценка сосудистой жесткости 5 больным диффузной формой склеродермии до и через 6 месяцев после сочетанной иммуносупрессивной терапии.
Выводы. У всех больных наблюдалось снижение показателей сосудистой жесткости на фоне умеренного эффекта от проводимой терапии.
Процитировать:
Иммунологическим признаком системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) является возникновение клеточных и гуморальных реакций, направленных против антигенов собственных клеток и тканей организма, которые сопровождаются появлением антинуклеарных антител (АНА). Выявление АНА имеет большое значение в диагностике и дифференциальной диагностике системной красной волчанки (СКВ), системного склероза (СС), синдрома Шегрена, других СЗСТ, а также аутоиммунных заболеваний печени и артритов. Под АНА понимают общее название семейства аутоантител к компонентам клетки, обычно направленных к нуклеиновым кислотам ядра клетки и ассоциированных с ними белкам, а также ряда белков нуклеолеммы и цитоплазмы клетки. Поэтому некоторые авторы рекомендуют новое название АНА — «антицеллюлярные антитела».
Процитировать:
Лапин С.В., Лазарева Н.М., Мазинг А.В., Булгакова Т.В., Маслянский А.Л., Тотолян А.А. Серологическая диагностика системных заболеваний соединительной ткани: методы, рекомендации и алгоритмы. Лаборатория. 2014; №3: С.14-20
Созина А.В., Иливанова Е.П., Шульман A.М., Шулъман М.А., Шемеровская Т.Г., Лапин С.В., Тотоляп А.А.КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИНУКЛЕАРНОГО ФАКТОРА, АНТИТЕЛ К ДВУСПИРАЛЬНОЙ ДНК И КАРДИОЛИПИНУ У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ. Клиническая лабораторная диагностика. 2008. № 5. С. 44-47.
Материал и методы. Нами было проведено исследование частоты выявления ААТ к РНП B1 у 300 больных с системными АРЗ, включая пациентов с ревматоидным артритом (РА), анкилозирующим спондилитом (АС), системной красной волчанкой (СКВ), системной склеродермией (ССД) и болезнью Шёгрена (БШ), а также у 53 пациентов, не страдавших АРЗ, которые составили контрольную группу. ААТ к РНП B1 оценивали в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа.
Результаты и обсуждение. Частота выявления ААТ к РНП B1 у пациентов с АРЗ была значительно выше, чем в группе контроля: 170 из 300 (56,6%) и 8 из 53 (13%) соответственно. При РА ААТ к РНП B1 были обнаружены у 78,5% (113 из 144 больных), при АС – у 40,3% (23 из 57), при ССД – у 67,5% (27 из 40), при СКВ – у 36,4% (16 из 44) и при БШ – у 13,3% (2 из 15). Диагностическая чувствительность маркера при РА составила 78,5%, диагностическая специфичность – 84,9%, отношение правдоподобия положительного результата – 5,24, отношение правдоподобия отрицательного результата – 0,24. У больных РА уровень ААТ к РНП B1 достоверно коррелирует с содержанием С-реактивного белка и СОЭ, в то время как у пациентов с ССД была установлена связь выявления ААТ к РНП B1 с жесткостью сосудистой стенки и наличием гипертензии. Частота выявления ААТ к РНП B1 среди больных РА серонегативных по ревматоидному фактору и антителам к циклическому цитруллинированному пептиду составила 15,4%.
Заключение. ААТ к РНП B1 являются полезным лабораторным маркером (при использовании в качестве верхней границы нормы 3,3 ед/мл), но имеют ограниченную ценность в диагностике РА. ААТ к РНП B1 можно рассматривать как дополнительный диагностический маркер РА.
Кузнецова П.А., Маслянский А.Л., Лапин С.В., Ткаченко О.Ю., Мазуров В.И. Антитела к гетерогенному ядерному рибонуклеопротеину В1 (RA33) при ревматоидном артрите и системной склеродермии. Научно-практическая ревматология. 2017;55(2):159-163. https://doi.org/10.14412/1995-4484-2017-159-163
Характерной особенностью диффузных болезней соединительной ткани (ДБСТ), таких как системная красная волчанка (СКВ), синдром Шогрена (СШ), ревматоидный артрит (РА) является появление в сыворотке крови ряда антинуклеарных антител (АНА). Целью нашей работы было определить место каждого из используемых лабораторных показателей в диагностике ДБСТ.
Нами были исследованы сыворотки 1312 пациентов с подозрением на ДБСТ, 105 больных с СКВ, 163 больных РА, 15 с СШ и 100 доноров. Определялись антинуклеарный фактор (АНФ) (НЕр-2-метод), антитела к экстрагируемому нуклеарному антигену (ЭНА), АНА с помощью лайнблота, антитела к двуспиральной ДНК IgG (дсДНК), к кардиолипину IgG и IgM (КЛ) и к бета 2 гликопротеину 1 (бета2ГП1). Для определения антител к дсДНК также использовалась иммунофлюоресценция на простейшем микроорганизме Crithidia luciliae (КЛИФ).
Встречаемость АНФ среди лиц в подозрением на ДБСТ составила 23,44% (309/1318). При СШ АНФ с гранулярным типом свечения отмечался в 100% (15/15) случаев. При СКВ и РА встречаемость АНФ составила 79% и 36% соответственно. В группе доноров АНФ был обнаружен у 3% обследованных, титр антител не превышал 1/80. Сыворотка 282 больных была обследована на наличие АНФ и антител к ЭНА. Сочетано АНФ и антитела к ЭНА определялись в 12% случаев (34/282), а в 7% случаев (20/282) были обнаружены только антитела к ЭНА. Из них при использовании лайнблота в 64% (7/11) случаев обнаруживались антитела к SS-A антигену, тогда как специфичность оставшихся 36% (4/11) сывороток установлена не была.
Для изучения сочетанной встречаемости АНФ и антител к дсДНК было обследовано 614 сывороток, из них антитела были обнаружены в 45,9% случаев. В 151 сыворотке АНФ и антитела к дсДНК сочетано обнаруживались в диагностических титрах. У 14,9% (42/282) обследованных при отсутствии АНФ, определялись антитела к дсДНК, при этом у 6,7% (19/282) в высокой концентрации (> 50 МЕ/мл). Таким образом, при концентрации дсДНК > 25 МЕ/мл чувствительность относительно АНФ составила 63% и специфичность 89%, а при содержании дсДНК > 50 МЕ/мл чувствительность составила 35% и специфичность – 95%.
Среди пациентов, обследованных на наличие антител к КЛ, АНФ и антител к дсДНК, высокое содержание антител к КЛ без АНФ и антител к дсДНК было обнаружено только у одного пациента, тогда как в остальных случаях повышение уровня антител к КЛ было связано с увеличением титров АНФ и антител к дсДНК, что указывает на наличие у данной группы больных ревматической патологии, вероятнее всего, СКВ.
Таким образом, информативность методов, применяемых для диагностики ДБСТ, повышается при сочетанном выявлении аутоантител, что позволяет оптимизировать иммунологическое обследование больных с ревматологической патологией.
Созина А.В., Неустроева Ю.А., Тихомирова Т.А., Лапин С.В. СОЧЕТАННАЯ ВСТРЕЧАЕМОСТЬ АУТОАНТИТЕЛ У БОЛЬНЫХ С ДИФФУЗНЫМИ БОЛЕЗНЯМИ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ. Медицинская иммунология. 2007;9(1):69-76. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2007-1-69-76