Холестерин и триглицериды представляют собой два основных класса липидов, которые вместе с фосфолипидами и апо-белками циркулируют в кровотоке в составе липопротеинов. Дислипидемии возникают при изолированном или сочетанном повышении уровня холестерина и/или триглицеридов, которое сопровождается изменением соотношения фракций липопротеинов. При циркуляции избыточных количеств холестерина или триглицеридов их молекулы проникают и накапливаются в сосудистой стенке чувствительных участков артерий (изгибы и ответвления), способствуя развитию атеросклероза. Основные фракции липопротеинов представлены хиломикронами, липопротеинами низкой плотности (ЛПНП), липопротеинами очень низкой плотности (ЛПОНП) и липопротеинами высокой плотности (ЛПВП). При нарушениях липидного обмена можно наблюдать следующие типы изменений:

• Изменение соотношения основных липидных фракций (классифицируются по ВОЗ);
• Появление патологических фракций: липопротеин (а), липопротеин (X) и др.;
• Изменение соотношения холестерина и триглицеридов в пределах определённого класса липопротеинов

Комплексная оценка липидных фракций идентифицирует все перечисленные типы нарушений, что позволяет установить тип дислипидемии по ВОЗ и провести объективную оценку риска сердечно-сосудистых заболеваний и инсульта. Согласно классификации ВОЗ, различают 5 типов дислипидемий, которые могут быть первичными (развиваться вследствие генетического дефекта обмена липидов), либо вторичными (быть следствием метаболических заболеваний). Риск сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) при нарушениях липидного обмена обусловлен изменением соотношения атерогенных (ЛПНП, ЛПОНП) и антиатерогенных фракций (ЛПВП). Согласно клиническим рекомендациям ЕОК/ЕОА по диагностике и лечению дислипидемий 2016 года уровень холестерина ЛПНП рекомендуется использовать в качестве основной мишени гиполипидемической терапии. У некоторых больных присутствует патологическая фракция: Липопротеин (а), обнаружение которой увеличивает риск сердечно-сосудистых заболеваний в 2-3 раза. Частицы ЛП(а) обладают структурой ЛПНП, в которых дополнительно присутствует аполипопротеин(а), при этом уровень ЛП(а) изменяется независимо холестерина ЛПНП.

Кроме того, на риск ССЗ может влиять изменение качественного состава липопротеинов, которое проявляется изменением соотношения холестерина и триглицеридов. В частности, при гипертриглицеридемии часто происходит обогащение ЛПВП триглицеридами, что приводит к уменьшению их антиатерогенных свойств. При этом атерогенность ЛПНП возрастает за счёт образования ЛПНП малой плотности (small dense LDL), хотя уровень холестерина ЛПНП может оставаться нормальным. Поэтому у больных с острым коронарным синдромом часто определяется повышение уровня триглицеридов при нормальном уровне холестерина ЛПНП.  При гиперхолестеринемии может происходить обогащение холестерином ЛПОНП, что увеличивает их атерогенные свойства.

Преимущества комплексной оценки содержания холестерина и триглицеридов в липидных фракциях методом электрофореза (тест 01.02.15.1165)

Электрофорез является недорогим и доступным методом разделения липопротеинов, который позволяет провести прямое полуколичественное измерение холестерина в основных фракциях липопротеинов, а также  обнаружить ЛП(а) с порогом определения 30 мг/дл.Одним из главных преимуществ метода является возможность прямого полуколичественного измерения ЛПНП. Обычно показатель ЛПНП является расчётным и определяется по формуле Фридвальда, которая может быть неточной в ряде случаев. Применение формулы Фридвальда при повышение сывороточного уровня триглицеридов более 150 мг/дл приводит к систематическому занижению величины ЛПНП, что может приводить к некорректной оценке риска ССЗ. По сравнению с ультрацентрифугированием, которое считается «золотым стандартом» разделения липопротеинов, электрофорез является быстрым и менее трудозатратным методом, при этом позволяет получить высокосопоставимые результаты. Сочетание двух вариантов окраски позволяет провести комплексную диагностику нарушений липидного обмена и определить тип дислипидемии по классификации ВОЗ, а также оценить соотношение триглицеридов и холестерина в каждом классе липопротеинов.

Методика исследования.

Комплексная оценка содержания холестерина и триглицеридов в липидных фракциях представляет собой комбинацию двух вариантов электрофореза липопротеинов. В первом варианте метода используется селективная окраска холестерина, которая позволяет провести прямое количественное измерение холестерина ЛПНП, ЛПОНП и ЛПВП для оценки риска ССЗ. При втором варианте проводится окраска триглицеридов, которая позволяет визуализировать основные липидные фракции, а также обнаружить дополнительную фракцию – Lp(а).

Электрофорез сыворотки крови проводится на буферизованном агарозном геле в полуавтоматическом электрофоретическом анализаторе SAS-1+(Helena Biosciences Europe). Для окраски триглицеридов после разделения липопротеинов пластина с гелем обрабатывается красителем Суданом красным, который обеспечивает специфическое окрашивание липопротеинов. Для окрашивания холестерина липидных фракций используется ферментативная реакция. Взаимодействие продукта реакции с хромогеном приводит к окрашиванию зон миграции холестерина в синий цвет. После высушивания гелей производится денситометрическое сканирование зон миграции образцов с помощью программного обеспечения Platinum (Helena Biosciences Europe). Параллельно с электрофорезом производится определение общей концентрации триглицеридов и холестерина на биохимическом анализаторе Random Access А-15 (BioSystems) с использованием коммерческих наборов Triglycerides и Cholesterol (BioSystems). После введения значений концентрации триглицеридов и холестерина в нг/дл в Platinum, программа производит расчёт абсолютного содержания липидов во фракциях в нг/дл.

Референсные значения:

Концентрация холестерина общая	< 200,0 мг/дл
Концентрация холестерина в липопротеинах высокой плотности (ЛПВП)	> 40,0 мг/дл - для мужчин, > 50,0 мг/дл - для женщин
Концентрация холестерина в липопротеинах очень низкой плотности (ЛПОНП)	< 15,0 мг/дл
Концентрация холестерина в липопротеинах низкой плотности (ЛПНП)	< 160,0 мг/дл
Концентрация холестерина в хиломикронах	Ниже предела обнаружения методом электрофореза
Концентрация холестерина в липопротеине (а)	Ниже предела обнаружения методом электрофореза
Концентрация триглицеридов общая	< 150,0 мг/дл
Концентрация триглицеридов в липопротеинах высокой плотности (ЛПВП)	6,5 – 66,5 мг/дл
Концентрация триглицеридов в липопротеинах очень низкой плотности (ЛПОНП)	3,5 - 34,5 мг/дл
Концентрация триглицеридов в липопротеинах низкой плотности (ЛПНП)	15,0 – 94,0 мг/дл
Концентрация триглицеридов в хиломикронах	Ниже предела обнаружения методом электрофореза; cледовые количества
Концентрация триглицеридов в липопротеине (а)	Ниже предела обнаружения методом электрофореза
Тип дислипидемии по классификации ВОЗ	Соотношение липидных фракций в пределах референсных значений – дислипидемии не выявлено

Интерпретация результата:

• Соотношение липидных фракций в пределах референсных значений – дислипидемии не выявлено

• Дислипидемия I типа характеризуется выраженным повышением уровня триглицеридов и преобладанием хиломикронов,  а также снижением ЛПВП и ЛПНП. Концентрация ЛПОНП в диапазоне нормальных значений или слегка повышена. Дислипидемия I типа встречается при редком наследственном нарушении липидного обмена с аутосомно-доминантным типом наследования: семейной хиломикронемии, для которой характерен дебют в детском возрасте.

• Дислипидемия IIа типа характеризуется повышением общего холестерина за счет значительного увеличения ЛПНП. Содержание ЛПВП в норме или понижено, общий уровень триглицеридов и ЛПОНП в норме, хиломикроны не обнаруживаются. Дислипидемия IIа встречается при семейной гиперхолестеринемии (аутосомно-доминантная форма составляет до 70% всех детских дислипидемий), при нефротическом синдроме, гипотиреозе, заболеваниях печени и других метаболических нарушениях.

• Дислипидемия IIb типа характеризуется повышением общего холестерина и триглицеридов за счет увеличения ЛПНП и ЛПОНП. Содержание ЛПВП в норме или понижено. Дислипидемия IIb встречается при семейной комбинированной гиперлипидемии, нефротическом синдроме, гипотиреозе, заболеваниях печени и других метаболических нарушениях.

• Дислипидемия III типа характеризуется значительным повышением уровня триглециридов и холестерина с появлением промежуточных липопротеинов, которое проявляется слиянием фракций ЛПНП и ЛПОНП. Дислипидемия III типа встречается при редкой семейной форме нарушения липидного обмена: дисбеталипопротенемия, которая ассоциирована с патологическими аллелями гена, кодирующего АпоЕ2. В редких случаях дислипидемия III типа развивается вторично при метаболических нарушениях (диабет, гипотиреоз).

• Дислипидемия IV типа характеризуется увеличением общего содержания триглицеридов с выраженным повышением ЛПОНП. Значения общего холестерина, ЛПВП и ЛПНП в норме или изменены незначительно. Гиперлипидемия IV типа встречается при редком наследственном дефекте липидного обмена с аутосомно-доминантным типом наследования - семейной гипертриглицеридемии, либо может развиваться вторично при хронических заболеваниях почек, алкоголизме, ожирении, диабете, панкреатите, болезнях накопления гликогена, а также при других метаболических нарушениях, сопровождающихся увеличением высвобождения свободных жирных кислот.

• Дислипидемия V типа характеризуется увеличением экзогенных и эндогенных триглицеридов, а также повышением уровня холестерина. Отмечается наличие хиломикронов, повышение ЛПОНП, уровень ЛПНП в норме или слегка повышен. Дислипидемия V типа встречается при семейной гипертриглицеридемии, может вторично развиваться при нефротическом синдроме, гипотиреозе, диабете, алкоголизме, панкреатите.

Также обращаем внимание, что только этот тест позволяет провести классификацию дислипидемий в соответствии с МКБ:

E78.0 Эссенциальная гиперхолестеринемия (включая семейную форму) тип IIa (ЛНП); E78.1 Эссенциальная гипертриглицеридемия тип IV (ЛОНП); Е78.2 Смешанная гиперлипидемия тип IIb (пре бета липопротеидемия); E78.3 Смешанная гипертриглицеридемия тип V и тип I; E78.4 Семейная комбинированная гиперлипидемия.