Определение высокоафинных антител к дсДНК на клетках C. Luciliae, методом непрямой иммунофлюоресценции

Антитела к двуспиральной ДНК (дсДНК) реагируют с фосфорибозным «скелетом» молекул двуспиральной эукариотической ДНК. Именно дсДНК является основным антигеном антинуклеарных антител при системной красной волчанке (СКВ), которые могут быть обнаружены у 50-70% больных этим заболеванием и принимают участие в патогенезе волчаночного поражения почек. Титры антител к дсДНК тесно коррелируют с концентрацией IgG-содержащих иммунных комплексов в сыворотке крови больных СКВ, а также активностью заболевания. Мониторинг концентрации антител к дсДНК важен для контроля эффективности терапии при системной красной волчанке. Исследования, выполненные для оценки значимости мониторинга концентрации антител к дсДНК, указывают на то, что активная профилактическая терапия при повышении титра антител к дсДНК, при условии динамического ежемесячного контроля, снижает количество обострений при СКВ, что ведет к улучшению прогноза у больных СКВ.

Исследование антител к дсДНК широко используется для диагностики системной красной волчанки. Однако традиционный метод иммуноферментного анализа (ИФА) часто дает неспецифические ложноположительные результаты при вирусных инфекциях, например, при инфекции вирусом гриппа. Кроме того, одной из причин ложноположительных результатов ИФА-тестов для выявления антител к дсДНК является контаминация односпиральными участками ДНК, антитела к которым не имеют диагностического значения при СКВ. Эти результаты могут быть причиной ошибочной постановки диагноза системной красной волчанки. Для того чтобы избежать ошибочного диагноза, международные рекомендации требуют подтверждения серологической реакции в отношении дсДНК метода ИФА с помощью альтернативного метода, в качестве которого используется выявление антител на клетках простейшего Crithidia luciliae. Простейший микроорганизм Crithidia luciliae имеет в составе кинетопласта суперспирализованную стабильную молекулу нативной ДНК, лишенную односпиральных последовательностей, поэтому специфичность определения антител к дсДНК с помощью Crithidia luciliae для диагностики СКВ выше, чем методом ИФА. Кинетопласт Crithidia lucilia не содержит ассоциированной РНК и нуклеопротеинов и представляет собой субстрат для непрямой иммунофлюоресценции. Так как ядро критидии не обладает четкой мембраной, даже высокие титры других аутоантител не мешают оценить специфическое свечение кинетопласта.

Референсные значения:  <1:10

Интерпретация:

• Выявление аутоантител к дсДНК на субстрате Cr.luciliae в диагностическом титре подтверждает диагноз системной красной волчанки и волчаночного нефрита.