Практические подходы к лабораторной оценке риска рецидивирующих тромбозов при антифосфолипидном синдроме

Полушин Ю.С., Гаврилова Е.Г., Шлык И....

Катастрофический антифосфолипидный синдром при COVID-19

2021

Тромбофилия, так же как и множественная органная дисфункция, ‒ характерное проявление новой коронавирусной инфекции, протекающей в тяжелой форме, которое очень напоминает клиническую картину катастрофического антифосфолипидного синдрома (кАФС).

Цель: оценить, является ли кАФС обязательным проявлением тяжелых форм COVID-19.

Материал и методы: 45 пациентов с подтвержденным диагнозом новой коронавирусной инфекции (SARS-CoV-2) и тяжелым течением вирусной пневмонии (более 3 баллов по шкале NEWS на момент поступления, КТ 3‒4, индекс оксигенации ниже 100, потребность как минимум в высокопоточной кислородотерапии). Основаниями для оценки развития у них кАФС являлась клиника прогрессирующей органной дисфункции, несмотря на проводимую интенсивную терапию; подозрение на тромбоэмболию легочной артерии и прогрессирующий тромбоз вен нижней конечности или подключичной вены. Обязательное условие ‒ отсутствие признаков присоединения бактериальной инфекции (прокальцитонин в крови менее 0,5 мкг/л). Диагностику антифосфолипидного синдрома осуществляли на основании выявления в крови антител к β-2-гликопротеину 1 (а/т β-2-ГП1 IgGAM, а/т β-2-ГП1 IgM, а/т β-2-ГП1 IgG) и к кардиолипину (а/т КЛ IgМ, а/т КЛ IgG) методом иммуноферментного анализа. Течение заболевания контролировали с помощью иных рутинно выполнявшихся клинических (t°, общий анализ крови и мочи) и биохимических исследований, отражавших выраженность системного воспалительного ответа (ферритин, ЦРБ, интерлейкин-6 и -18), состояние систем гемостаза, дыхания, кровообращения, печени и почек.

Результаты. Антифосфолипидные антитела (аАФЛ), умеренно превышающие референсные значения, выявлены у 9 (20%) пациентов из 45 обследованных в основном за счет изотипов IgА и IgM к β-2-гликопротеину 1 и изотипа IgM к кардиолипину. Оценка титра антител у 5 пациентов в динамике (через 7 сут) выявила их снижение, однако это не сказалось на исходе (4 из них умерли). У 36 больных обнаружены следы аАФЛ, не достигающие нижней границы нормы, несмотря на однотипность клинической картины и схожесть биохимических показателей, отражающих тяжесть органных нарушений. Отсутствие антител не предотвратило развитие тромботических осложнений (тромбозы крупных сосудов и тромбоэмболия легочной артерии у 5 больных). Не обнаружено других, часто ассоциируемых с кАФС проявлений (тромбоцитопении, гемолитической анемии, снижения концентрации фибриногена в крови).

Вывод. Катастрофический антифосфолипидный синдром не является обязательным при тяжелом течении COVID-19, но это, однако, не исключает вероятности его развития в качестве одного из проявлений тромбофилии, имеющей место у таких пациентов.

Процитировать:
Полушин Ю.С., Гаврилова Е.Г., Шлык И.В., Лапин С.В., Ткаченко О.Ю. Катастрофический антифосфолипидный синдром при COVID-19. Вестник анестезиологии и реаниматологии. 2021;18(1):17-26. https://doi.org/10.21292/2078-5658-2021-18-1-17-26

Лапин С.В., Калленберг К.Г., Тотолян А.А

Апоптоз Т-лимфоцитов и антифосфолипидные антитела в крови больных системной красной волчанкой

1999

Процитировать:

Лапин С.В., Калленберг К.Г., Тотолян А.А. АПОПТОЗ Т-ЛИМФОЦИТОВ И АНТИФОСФОЛИПИДНЫЕ АНТИТЕЛА В КРОВИ БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ. Медицинская иммунология. 1999. № 1. С. 3.

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Мазинг А.В...

Сравнительный анализ иммунологических методов детекции антифосфолипидных антител

2017

Лабораторная диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС) состоит в выявлении антифосфолипидных антител (АФА) методом иммуноферментного анализа (ИФА), а именно в детекции антикардиолипиновых (аКл) антител и антител к β2-гликопротеину (aβ2Гп). Несмотря на то, что серологическая диагностика играет решающую роль в постановке диагноза АФС, использование лабораторных тестов затруднено их недостаточной стандартизацией. Новым подходом к детекции антифосфолипидных антител стало использование иммуноблоттинга на основе поливинилиденфторидной (ПВДФ) мембраны. Преимущество этого метода по сравнению с методом ИФА — использование для сорбции антигенов гидрофобной твердой фазы. Пористая структура ПВДФ мембраны ориентирует гидрофильные участки фосфолипидов и обеспечивает тем самым более плотное их распределение, имитируя билипидный слой мембран живого организма. Для уточнения и сравнения ценности разных методов мы сопоставили результаты измерения АФА на ИФА тест-системах разных производителей и наборах реактивов для иммуноблоттинга. Нами собрана коллекция биоматериала 47 пациентов с некардиоэмболическими ишемическими инсультами, 20 пациентов с рецидивирующими тромбозами глубоких вен нижних конечностей и 50 пациентов с акушерской патологией, а также 30 здоровых доноров. В данных сыворотках измерены аКлаIgG, аКлаIgM, аβ2ГП1 методом ИФА с помощью немецких тест-систем фирм Euroimmun и Orgentec Diagnostica, образцы с наиболее высоким титром — методом иммуноблоттинга на реактивах фирмы Medipan. На основании измерений АФА различными ИФА тест-системами частота aβ2ГП1 составила 31% для Euroimmun ИФА наборов реактивов, 78% — для Orgentec Diagnostica ИФА тест-систем, аКлIgG — 2 и 30%, аКлIgM — 31 и 54% соответственно. Измерив АФА методом иммуноблоттинга на тест-системах фирмы Medipan в биообразцах с наиболее высокими титрами, мы обнаружили аβ2ГП1 у всех пациентов, аКлIgG — у 70%, аКлIgM — у 30% пациентов. Сходимость между тремя коммерческими наборами реактивов варьирует от 20 до 88%. Стандартизация коммерческих тест-систем все еще не достигнута. Новый метод иммуноблоттинга может быть использован в сочетании с классическими методами серологической диагностики АФС. Отсутствие алгоритмов диагностики и стандартизации различных тест-систем для детекции АФА ставит под сомнение достоверность серологического диагноза АФС, а следовательно и существование АФС как нозологической единицы.

Процитировать:

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В, Лазарева Н.М., Шмонин А.А., Соловьева Л.Н., Бондарева Е.А., Сельков, С.А., Чепанов С.В.,Тотолян А.А. Сравнительный анализ иммунологических методов детекции антифосфолипидных антител. Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62(1): 40-44.

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Мазинг А.В...

Новые методы выявления антифосфолипидных антител

2019

Цель обзора: освещение представлений о современных методах выявления антифосфолипидных антител (АФА) в крови.

Основные положения. В настоящее время в большинстве клинических лабораторий уровень АФА измеряют методом иммуноферментного анализа с помощью специальных тест-систем, которые имеют ряд серьезных недостатков. Преимущества новых методов выявления АФА — улучшение параметров сорбции антигенов, автоматизация, мультиплексный подход. Хемилюминесцентные анализаторы позволяют добиться очень высокой точности при измерении высоких титров АФА и в диагностике антифосфолипидного синдрома демонстрируют чувствительность, достигающую 100%, при специфичности 72,3%. Мультиплексный лайн-дот быстрее и эффективнее выявляет женщин с наличием сразу трех видов АФА и дает возможность выделить среди них группу наибольшего риска осложнений беременности. Этот тест также обнаруживает антитела к домену 1 β2-гликопротеина I.

Заключение. Новые методы обнаружения АФА могут повысить точность диагностики аутоиммунных заболеваний.

Процитировать:

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Мазинг А.В., Блинова Т.В., Бутина С.Е., Эмануэль В.Л. Новые методы выявления антифосфолипидных антител. Доктор.Ру. 2019; 10(165): 57–62. DOI: 10.31550/1727-2378-2019-165-10-57-62

Белолипецкая Е.А., Беляева И.Б., Мазу...

Клинико-иммунологические взаимосвязи при системной красной волчанке с антифосфолипидным синдромом

2017

Антифосфолипидные антитела (АФА): волчаночный антикоагулянт (ВА), антикар- диолипиновые антитела (аКЛ) и антитела к β2-гликопротеиду I (анти-β2-ГП-I) обнаруживаются у больных с системной красной волчанкой (СКВ) с частотой от 12 до 44%. В среднем у 50% боль- ных с СКВ и наличием АФА развивается антифосфодипидный синдром (АФС). При серонега- тивном варианте АФС не определяются диагностически значимые титры «классических» анти- тел, но могут присутствовать другие антитела к фосфолипидам: антитела к протромбину (аПТ), антитела к аннексину V, антитела к фосфатидилэтаноамину (аФЭ), антитела к фосфатидилсе- рин/протромбиновому комплексу (аФС-ПТ) и антитела к отрицательно заряженным фосфоли- пидам. Наличие четырёх антител (ВА+аКЛ+анти-β2-ГП-I+аПТ) ассоциируется с трёхкратным увеличением риска тромбообразования. У больных с СКВ и АФС, осложненным рецидивирую- щими тромбозами, наличие аКЛ и анти-β2-ГП-I ассоциировано с аллелем dRB1*0402.

Процитировать:

Белолипецкая Е.А., Беляева И.Б., Мазуров В.И., Трофимов Е.А., Лапин С.В. КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ВЗАИМОСВЯЗИ ПРИ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙВОЛЧАНКЕ С АНТИФОСФОЛИПИДНЫМ СИНДРОМОМ // Вестник Северо-Западного государственного медицинского университета им. И.И. Мечникова. - 2017. - Т. 9. - №3. - C. 7-11. doi: 10.17816/mechnikov2017937-11

Беляева М.А., Бобров С.А., Лапин С.В.

Клинико-иммунологические взаимосвязи при привычном невынашивании беременности и методы их коррекции (обзор)

2015

Литературный обзор посвящён проблеме репродуктивных потерь, связанных с нарушениями иммунных механизмов, обеспечивающих прогрессирование беременности. Повышение экспрессии цитокинов Т-хелперов 1-го типа лежит в основе иммунной этиологии репродуктивных потерь. Снижение активности Т-регуляторных лимфоцитов приводит к развитию привычного невынашивания беременности. Представлены важнейшие механизмы цитокиновой регуляции прогрессирования беременности. Рассмотрены основные аутоиммунные состояния, ведущие к гибели плода: антифосфолипидный синдром, повышение активности натуральных киллеров, совместимость супругов по системе HLA, наличие антинуклеарных, антигистоновых, антиспермальных антител и антител к хорионическому гонадотропину человека. Представлены современные патогенетически обоснованные методы медикаментозной коррекции иммунологических механизмов привычного невынашивания беременности.

Процитировать:

Беляева М.А., Бобров С.А., Лапин С.В. КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ВЗАИМОСВЯЗИ ПРИ ПРИВЫЧНОМ НЕВЫНАШИВАНИИ БЕРЕМЕННОСТИ И МЕТОДЫ ИХ КОРРЕКЦИИ (ОБЗОР). Вестник Северо-Западного государственного медицинского университета им. И.И. Мечникова. 2015. Т. 7. № 3. С. 118-123.

Белолипецкая Е.А., Беляева И.Б., Мазу...

Значение определения аллельных генов HLA-DRB1 и спектра антифосфолипидных антител для прогнозирования ответа на иммуносупрессивную терапию у пациентов с системной красной волчанкой и антифосфолипидным синдромом

2018

Цель исследования: изучить влияние разных схем иммуносупрессивной терапии на клинико-иммунологическую активность и динамику антифосфолипидных антител (АФА) у больных системной красной волчанкой (СКВ) и антифосфолипидным синдромом (АФС) в зависимости от выявленных групп аллельных генов HLA локуса DRB1.

Материал и методы. В исследование включено 52 пациента с активной СКВ. Их разделили на две группы по 26 человек. Основную группу составили больные СКВ с АФА, 19 из них с АФС, контрольную – больные СКВ без АФА. В зависимости от терапии пациенты обеих групп были разделены на две подгруппы. Подгруппа А получала комбинированную пульс-терапию метилпреднизолоном 1000 мг в/в капельно № 3 и циклофосфамидом 1000 мг в/в капельно однократно. Кроме того, два пациента с СКВ и АФС применяли ритуксимаб 1000 мг в/в капельно два введения с перерывом две недели. Подгруппе Б назначены преднизолон 1 мг/кг/сут перорально в течение четырех недель, Плаквенил 200 мг/сут и азатиоприн 100 мг/сут. В дальнейшем все участники исследования получали комбинированную терапию: перорально преднизолон 0,5 мг/кг/сут со снижением дозы до 0,2 мг/кг/сут, Плаквенил 200 мг/сут и азатиоприн 100 мг/сут. Длительность наблюдения – шесть месяцев. Оценивались активность СКВ по индексу SELENA-SLEDAI, уровень антител к двуспиральной ДНК, компоненты комплемента и АФА, определялись группы аллельных генов HLA локуса DRB1.

Результаты. У пациентов с СКВ и АФС по сравнению с больными СКВ с бессимптомным носительством АФА наблюдается более значимая активность заболевания по индексу SELENA-SLEDAI и высокий уровень антикардиолипиновых антител иммуноглобулина (Ig) G и антител к бета-2-гликопротеину 1 (анти-бета-2-ГП-1). При активном течении СКВ, сочетающейся с АФС, применение интенсивных схем иммуносупрессивной терапии, включающих комбинированную пульс-терапию метилпреднизолоном и циклофосфамидом, способствует существенному снижению активности заболевания по индексу SELENA-SLEDAI, уровня антител к фосфатидилсерин-протромбиновому комплексу, аннексину IgM, анти-бета-2-ГП-1. Аллельный ген HLA-DRB1*13 чаще обнаруживается у пациентов с СКВ и АФС. У больных СКВ, являющихся носителями аллельного гена HLA-DRB1*07, применение иммуносупрессивной терапии достоверно чаще приводит к снижению клинико-лабораторной активности СКВ (≤ 3 балла по индексу SELENA-SLEDAI), чем у носителей других локусов DRB1.

Процитировать:

Белолипецкая Е.А., Беляева И.Б., Мазуров В.И., Лапин С.В., Ткаченко О.Ю., Гусева В.И., Трофимов Е.А., Инамова О.В. ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЛЕЛЬНЫХ ГЕНОВ HLA-DRB1 И СПЕКТРА АНТИФОСФОЛИПИДНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ОТВЕТА НА ИММУНОСУПРЕССИВНУЮ ТЕРАПИЮ У ПАЦИЕНТОВ С СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ И АНТИФОСФОЛИПИДНЫМ СИНДРОМОМ. Эффективная фармакотерапия. 2018. № 4. С. 16-21.

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Шмонин А.А...

Детекция антифосфолипидных антител новым методом иммуноблоттинга

2017

Лабораторная диагностика антифосфоли пидного синдрома (АФС) состоит в выявлении антифосфолипидных антител (АФА) методом иммуноферментного анализа (ИФА), а именно в детекции антикардиолипиновых (аКл) антител и антител к бета-2-гликопротеину (aβ2Гп). Использование классических ИФА тест-систем затруднено их недостаточной стандартизацией. Новым подходом к детекции антифосфолипидных антител является использование иммуноблоттинга, преимуществом которого является сорбция антигенов на гидрофобной PVDF-мембране и комплексный подход к диагностике АФС.

Процитировать:

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Шмонин А.А., Соловьева Л.Н., Бондарева Е.А., Сельков С.А., Чепанов С.В. ДЕТЕКЦИЯ АНТИФОСФОЛИПИДНЫХ АНТИТЕЛ НОВЫМ МЕТОДОМ ИММУНОБЛОТТИНГА. Медицинская иммунология. 2017. Т. 19. № S. С. 372.

Долгова Ю.С., Еремеева Д.Р., Зайнулин...

Встречаемость антифосфолипидных антител при наличии отягощенного акушерско-гинекологичекого анамнеза и отягощенного тромботичекого анамнеза

2018

В последние годы возрастает внимание к роли нарушений в системе гемостаза, в частности, к приобретенной иммунной тромбофилии – антифосфолипидному синдрому в развитии осложнений беременности. Антифосфолипидный синдром (АФС) – симптомокомплекс, сочетающий определенные клинические признаки и лабораторные данные: наличие антифосфолипидных антител (АФА) в сочетании с артериальными и венозными тромбозами, синдромом потери плода, иммунной тромбоцитопенией и\или неврологическими расстройствами. Встречаемость АФС у пациенток с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом (ОАГА) и отягощенным тромботическим анамнезом (ОТА) достаточно велика. Эту категорию женщин необходимо обследовать на наличие патологии, чтобы определить группу риска по возможным осложнениям и при необходимости использовать дополнительные методы лечения для успешного исхода беременности.

Процитировать:

Долгова Ю.С., Еремеева Д.Р., Зайнулина М.С., Лапин С.В., Ткаченко О.Ю. ВСТРЕЧАЕМОСТЬ АНТИФОСФОЛИПИДНЫХ АНТИТЕЛ ПРИ НАЛИЧИИ ОТЯГОЩЕННОГО АКУШЕРСКО-ГИНЕКОЛОГИЧЕКОГО АНАМНЕЗА И ОТЯГОЩЕННОГО ТРОМБОТИЧЕКОГО АНАМНЕЗА. Акушерство и гинекология Санкт-Петербурга. 2018. № 2. С. 7-7a.

Беляева И.Б., Мазуров В.И., Белолипец...

Влияние различных схем иммуносупрессивной терапии на динамику показателей клинико-иммунологической активности у больных системной красной волчанкой с антифосфолипидным синдромом

2019

Цель исследования – оценка влияния различных схем иммуносупрессивной терапии, включая применение ритуксимаба, на клинико-иммунологическую активность и динамику антифосфолипидных антител (АФА) у больных системной красной волчанкой (СКВ) и СКВ с антифосфолипидным синдромом (АФС).

Материал и методы. В исследование было включено 52 пациента с активным течением СКВ, разделенных на две группы: основная группа – 26 пациентов с СКВ и наличием АФА, из них 19 больных с АФС; контрольная группа – 26 больных СКВ без АФА. Группы были сравнимы по полу, возрасту, длительности и активности заболевания. В зависимости от варианта терапии, подавляющей активность СКВ, пациенты основной и контрольной групп были разделены на две подгруппы: подгруппа A получала комбинированную пульс-терапию метилпреднизолоном по 1000 мг внутривенно капельно № 3 и циклофосфамидом по 1000 мг внутривенно капельно однократно. Два пациента с СКВ и АФС получили ритуксимаб по 1000 мг внутривенно капельно: 2 введения с перерывом в 2 нед. Подгруппа В получала терапию преднизолоном внутрь по 1 мг/кг/сут в течение 4 нед. В дальнейшем всем пациентам назначалась комбинированная терапия внутрь: преднизолон по 0,5 мг/кг/сут со снижением дозы до 0,2 мг/кг/сут, гидроксихлорохин по 200 мг/сут и азатиоприн по 100 мг/сут. Проводилась оценка клинической активности СКВ по шкале SELENA SLEDAI, уровня антител к двуспиральной ДНК, компонентов комплемента и АФА через 6 мес наблюдения.

Результат и заключение. При активном течении СКВ и СКВ с АФС применение комбинированной пульс-терапии метилпреднизолоном и циклофосфамидом, а также ритуксимаба, в отличие от пероральных подавляющих доз преднизолона в комбинации с плаквенилом и азатиоприном, приводит к значимому снижению клинико-лабораторной активности заболевания по шкале SELENA SLEDAI и уровня АФА (антител к фосфатидилсерин-протромбиновому комплексу, аннексину IgM и β2-гликопротеиду I).

Процитировать:

Беляева И.Б., Мазуров В.И., Белолипецкая Е.А., Лапин С.В., Ткаченко О.Ю., Гусева В.И., Инамова О.В.ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ СХЕМ ИММУНОСУПРЕССИВНОЙ ТЕРАПИИ НА ДИНАМИКУ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ С АНТИФОСФОЛИПИДНЫМ СИНДРОМОМ. Терапия. 2019. Т. 5. № 6 (32). С. 19-2.

Белолипецкая Е.А., Беляева И.Б., Мазу...

Влияние иммуносупрессивной терапии на клинико-иммунологическую активность больных системной красной волчанкой с антифосфолипидным синдромом

2017

Целью настоящего исследования было изучение влияние различных схем иммуносупрессивной терапии на клинико-иммунологическую активность и динамику антифосфолипидных антител (АФА) у больных системной красной волчанкой (СКВ) с антифосфолипидным синдромом (АФС). В исследование были включены 52 пациента с активным течением СКВ, разделенных на две группы: в основную группу вошли 26 пациентов с СКВ и наличием АФА, из них 19 больных АФС; в контрольную группу были включены 26 больных СКВ без АФА. Группы были сравнимыми по полу, возрасту, длительности и активности заболевания. В зависимости от варианта терапии, подавляющей активность СКВ, пациенты основной и контрольной групп были разделены на две подгруппы: подгруппа А получала комбинированную пульс-терапию метилпреднизолоном 1000 мг внутривенно (в/в) капельно № 3 и циклофосфамидом 1000 мг в/в капельно однократно. Два пациента с СКВ и АФС получали ритуксимаб 1000 мг в/в капельно 2 введения с перерывом в 2 недели. Подгруппа В получала терапию преднизолоном внутрь 1 мг/кг/сут 4 недели. В дальнейшем всем пациентам назначалась комбинированная терапия внутрь: преднизолон 0,5 мг/кг/сут со снижением дозы до 0,2 мг/кг/сут, плаквенил 200 мг/сут и азатиоприн 100 мг/сут. Проведена оценка клинической активности СКВ по шкале SELENA SLEDAI, уровня антител к двуспиральной ДНК, компонентов комплемента и АФА через 6 месяцев наблюдения. При активном течении СКВ и СКВ с АФС применение комбинированной пульс-терапии метилпреднизолоном и циклофосфамидом, а также ритуксимаба в отличие от назначения пероральных подавляющих доз преднизолона в комбинации с плаквенилом и азатиоприном приводит к значимому снижению клинико-лабораторной активности заболевания по шкале SELENA SLEDAI и уровня АФА (аФС-Пт, антител к аннексину IgM и анти-β2-ГП-I). Согласно полученным результатам, применение комбинированной пульс-терапии метилпреднизолоном и циклофосфамидом, а также ритуксимаба приводит к уменьшению риска тромботических осложнений и улучшению прогноза СКВ.

Процитировать:

Белолипецкая Е.А., Беляева И.Б., Мазуров В.И., Лапин С.В., Ткаченко О.Ю., Гусева В.И., Инамова О.В. ВЛИЯНИЕ ИММУНОСУПРЕССИВНОЙ ТЕРАПИИ НА КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ С АНТИФОСФОЛИПИДНЫМ СИНДРОМОМ. Фарматека. 2017. № S4. С. 46-51.

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Шмонин А.А...

Анализ спектра антифосфолипидных антител у пациентов с тромбозами и привычным невынашиванием беременности

2018

Лабораторная диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС) состоит в выявлении антифосфолипидных антител (АФА) методом иммуноферментного анализа (ИФА), а именно в детекции антикардиолипиновых (аКл) антител и антител к бета-2-гликопротеину (aβ2GP1). Использование классических ИФА тест-систем затруднено их недостаточной стандартизацией. Новым подходом к детекции антифосфолипидных антител является использование мультиплексного лайн-блоттинга (ЛБ), преимуществом которого является сорбция антигенов на гидрофобной PVDF-мембране и детекция спектра АФА.
Целью данного исследования является анализ диагностической ценности нового ЛБ в постановке серологического диагноза АФС.
Нами была собрана коллекция образцов сывороток 45 пациентов с некардиоэмболическими ишемическими инсультами, 19 пациентов с рецидивирующими тромбозами глубоких вен нижних конечностей и 44 пациента с привычным невынашиванием беременности, а также 50 клинически здоровых доноров. В данных сыворотках были измерены аКл IgG, аКл IgM, aβ2GP1 методом ИФА с помощью тест-систем фирм Euroimmun (ПР1) и Orgentec Diagnostica (ПР2) и аКл IgG, аКл IgM, aβ2GP1, а также некритериальные АФА – методом иммуноблоттинга на тест-системе фирмы Medipan (ПР3).
При использовании ИФА тест-систем ПР1 аКл и aβ2GP1 детектировались у 30,5 % пациентов. ИФА методом на тест-системах ПР2 АФА были обнаружены у 38% пациентов. Методом ЛБ аКл и aβ2GP1 были выявлены у 30% пациентов. Встречаемость средних и высоких титров АФА, измеренных методом ИФА на тест-системах ПР1 и ПР2, составила 12 и 11% соответственно, а методом ЛБ – 16,6%. При анализе спектра АФА методом ЛБ чаще всего обнаруживались aβ2GP1, аФс, аКл, аАн V, аФк.

Метод мультиплексного лайн-блоттинга ЛБ показывает более высокую чувствительность при детекции средних и высоких титров АФА, а также позволяет выявить пациентов с множественной АФА позитивностью.

Процитировать:

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Шмонин А.А., Соловьева Л.H., Бондарева E.А., Сельков С.А., Чепанов С.В., Тотолян А.А., Роггенбук Д. АНАЛИЗ СПЕКТРА АНТИФОСФОЛИПИДНЫХ АНТИТЕЛ У ПАЦИЕНТОВ С ТРОМБОЗАМИ И ПРИВЫЧНЫМ НЕВЫНАШИВАНИЕМ БЕРЕМЕННОСТИ. Медицинская иммунология. 2018;20(5):753-762. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2018-5-753-762

Практические подходы к лабораторной оценке риска рецидивирующих тромбозов при антифосфолипидном синдроме

Аннотация